Anticorps monoclonal anti-CD63 pour WB, IHC-P, ELISA - P08962

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD63

• Le CD63 est un membre de la superfamille des tétraspanines, également connu sous les noms de granulophysine, LAMP-3, ME491 et Tspan-30, et joue des rôles variés dans l'adhésion cellulaire, la signalisation et le trafic vésiculaire.
• Il fonctionne comme récepteur de surface cellulaire pour TIMP1, activant la signalisation en aval via les voies ITGB1/intégrine qui favorisent la survie cellulaire, la migration et la réorganisation du cytosquelette via AKT, FAK/PTK2 et les MAP kinases.
• Le CD63 participe à la signalisation VEGFA en régulant l'internalisation de KDR/VEGFR2, et est essentiel pour le trafic normal du domaine luminal de PMEL requis pour le développement et la maturation des mélanocytes.
• La protéine est localisée sur la membrane cellulaire, les membranes lysosomales et endosomales tardives, les corps multivésiculaires et les mélanosomes, et peut être sécrétée sur les exosomes extracellulaires, ce qui témoigne de son implication dans le transport intracellulaire et la communication intercellulaire.
• Le CD63 est fortement glycosylé et palmitoylisé, avec un poids moléculaire observé compris entre 17 kDa et 25 kDa en raison d'une glycosylation variable, qui est essentielle pour son trafic et ses interactions fonctionnelles.
• L'expression tissulaire est particulièrement marquée dans les plaquettes, les mélanocytes (naevi dysplasiques, mélanomes primaires), les cellules hématopoïétiques et les macrophages tissulaires, ce qui souligne sa pertinence dans la biologie du cancer et des cellules immunitaires.
• Il contribue à l'extravasation des leucocytes en régulant le trafic de SELP vers la surface endothéliale, et peut moduler la dégranulation des mastocytes spécifiquement via la stimulation par Ms4a2/FceRI.

Conseils expérimentaux et techniques

• Pour le western blot, préparez les échantillons dans des conditions réductrices et sachez que le CD63 migre sous forme d'une bande diffuse ou de plusieurs bandes entre 17 et 25 kDa en raison de sa glycosylation hétérogène ; validez la spécificité avec des contrôles appropriés.
• En immunohistochimie (IHC-P), des méthodes robustes de récupération d'antigène (par exemple, tampon citrate, pH 6,0, induite par la chaleur) sont recommandées en raison de la nature transmembranaire de l'antigène ; testez sur des tissus positifs connus comme le mélanome ou des couches riches en plaquettes.
• Pour les applications ELISA, associez cet anticorps à des réactifs de détection correctement adaptés et confirmez la linéarité et la sensibilité à l'aide de standards de CD63 recombinants ou d'échantillons biologiques comme des lysats cellulaires ou des préparations d'exosomes.
• L'immunogène correspondant à la grande boucle extracellulaire (acides aminés 103-203), l'anticorps reconnaît probablement un épitope accessible dans des conditions natives et dénaturées ; prenez cela en compte lors de la conception de stratégies de capture ou de détection.

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