Anticorps monoclonal de lapin anti-CD62P/P-selectine pour WB, IHC-P, IF-P, ELISA - P16109

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la P-selectine

• La P-selectine (SELP), également appelée CD62P, GMP-140, LECAM3 et PADGEM, est un membre de la famille des sélectines, une famille de molécules d'adhésion cellulaire. C'est une glycoprotéine transmembranaire de type I qui comporte un domaine lectine de type C N-terminal, un domaine de type EGF, plusieurs répétitions sushi (SCR) et une queue cytoplasmique.
• Elle agit comme un récepteur dépendant du Ca²⁺ qui se lie à des ligands glucidiques, principalement le sialyl-Lewis X, sur les cellules myéloïdes comme les neutrophiles et les monocytes. Cette interaction médie l'attachement initial et le roulement des leucocytes sur l'endothélium activé et les plaquettes au cours de l'inflammation.
• Par l'intermédiaire de son contre-récepteur SELPLG (PSGL-1) présent sur les leucocytes, la P-selectine favorise le roulement des leucocytes le long des parois vasculaires, une étape préalable indispensable à l'adhésion ferme et à l'extravasation.
• De plus, la P-selectine facilite les interactions intercellulaires et l'adhésion en se liant aux intégrines αIIb/β3 (ITGA2B:ITGB3) et αV/β3 (ITGAV:ITGB3), contribuant à la formation d'agrégats plaquettes-leucocytes. Références associées : PMID:37184585
• Au niveau sous-cellulaire, la P-selectine est stockée dans les granules α des plaquettes et les corps de Weibel-Palade des cellules endothéliales. Lors de l'activation cellulaire par des agonistes comme la thrombine ou l'histamine, elle est rapidement translocalisée vers la membrane plasmique.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la formation de ponts disulfure, la palmitoylation sur les résidus cystéine cytoplasmique et la glycosylation N-liée. Mots-clés : Adhésion cellulaire, Calcium, Pont disulfure, Glycoprotéine, Lipoprotéine, Membrane, Liaison aux métaux.
• La masse moléculaire calculée de la protéine est d'environ 91 kDa ; elle peut présenter des décalages de migration sur SDS-PAGE en raison de l'hétérogénéité de la glycosylation.

Conseils expérimentaux et indications techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 42 à 771 de la P-selectine humaine, ce qui correspond à quasiment toute la région extracellulaire. Cette conception favorise la reconnaissance des conformations natives dans les applications sur cellules.
• Pour le Western blot, nous recommandons d'utiliser des conditions réductrices et un marqueur de poids moléculaire autour de 91 kDa. En raison de la glycosylation, la bande peut apparaître diffuse ou migrer légèrement plus haut.
• En immunohistochimie (paraffine), un démasquage antigénique (thermique ou enzymatique) est recommandé ; validez la spécificité de l'anticorps sur un tissu inflammé où l'expression de la P-selectine est augmentée.
• Pour l'immunofluorescence, la perméabilisation permet la détection à la fois des stocks intracellulaires et de la protéine transloquée à la surface. Une co-localisation avec des marqueurs d'organites (par exemple le facteur von Willebrand pour les corps de Weibel-Palade) peut être informative.
• Étant un anticorps monoclonal de lapin, il est compatible avec les protocoles de marquage multiplex utilisant des anticorps primaires de souris.

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