Anticorps polyclonal anti-CD59 pour WB, ELISA - P13987

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD59

• La glycoprotéine CD59 (également connue sous le nom de protectine, HRF20, MACIF, MIRL, MAC-IP) est un inhibiteur de surface cellulaire du complexe d'attaque membranaire (MAC) du complément.
• Elle inhibe puissamment l'assemblage du MAC en se liant aux composants C8 (C8A et C8B) et en empêchant l'incorporation de C9 dans le pore en formation, protégeant ainsi les cellules humaines de la lyse médiée par le complément. Références associées : PMID:11882685 PMID:1698710 PMID:2475111 PMID:36797260
• Une forme soluble du CD59, trouvée dans l'urine, conserve la liaison au complément mais présente une activité inhibitrice du MAC grandement réduite sur les membranes cellulaires.
• Le CD59 est ancré à la membrane plasmique via une liaison glycosylphosphatidylinositol (GPI) et est également détectable sous forme de protéine sécrétée.
• La protéine subit de multiples modifications post-traductionnelles, notamment une glycosylation N-liée, la formation de ponts disulfure et une glycation, qui contribuent à sa stabilité structurelle et à sa fonction.
• La déficience génétique en CD59 est associée à une anémie hémolytique héréditaire, soulignant son rôle critique dans la protection des érythrocytes contre l'attaque du complément.
• Le gène CD59 subit un épissage alternatif, produisant plusieurs variants de transcrits qui peuvent contribuer à la diversité fonctionnelle.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond au domaine extracellulaire mature du CD59 (aa 26–128), ce qui suggère que l'anticorps reconnaît principalement la forme native ancrée par GPI sur les surfaces cellulaires et les formes solubles dépourvues de l'ancre GPI.
• Pour l'analyse par Western blot de lysats de cellules ou de tissus humains, une bande d'environ 14 kDa est attendue ; cependant, la N-glycosylation peut entraîner un élargissement de la bande ou un poids moléculaire apparent légèrement plus élevé. Envisagez d'utiliser des conditions réductrices et de valider avec des contrôles appropriés.
• Dans les applications ELISA, cet anticorps polyclonal peut être utilisé pour la capture de l'antigène ou la détection du CD59 dans le sérum humain, le plasma ou les préparations de protéines recombinantes. Des expériences de titrage (par exemple, 1–5 µg/mL pour le revêtement) sont recommandées pour optimiser les rapports signal/bruit.
• En tant que réactif polyclonal, confirmez expérimentalement la réactivité croisée entre espèces si vous étudiez des modèles non humains, et incluez des contrôles négatifs appropriés pour tenir compte de toute liaison non spécifique.

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