Anticorps monoclonal Anti-CD50 (ICAM-3) pour FC - P32942

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD50 (ICAM-3)

• CD50, également appelé ICAM-3 ou CDw50, est un membre de la famille des molécules d'adhésion intercellulaire (ICAM) et agit comme ligand pour l'intégrine LFA-1 (ITGAL/ITGB2), médiant l'adhésion des leucocytes et facilitant la phagocytose des neutrophiles apoptotiques par les macrophages. Références associées : PMID:1448173 PMID:1448174 PMID:23775590
• Il agit comme ligand pour l'intégrine ITGAD/ITGB2, contribuant aux interactions cellule-cellule au sein du système immunitaire. Références associées : PMID:8777714
• CD50 se lie à CD209 sur les cellules dendritiques par un mécanisme dépendant du Ca²⁺ et indépendant des intégrines, établissant le contact initial entre les cellules dendritiques et les lymphocytes T quiescents et favorisant la prolifération des lymphocytes T. Références associées : PMID:10721994
• La protéine est exprimée constitutivement uniquement sur les leucocytes quiescents et est absente des cellules endothéliales au repos ou activées par des cytokines. Références associées : PMID:8325327 PMID:1448174
• Au niveau sous-cellulaire, CD50 se localise à la membrane cellulaire et c'est une protéine membranaire de type I à passage unique.
• Il appartient à la superfamille des immunoglobulines et contient plusieurs domaines de type Ig, des liaisons disulfure et des sites de glycosylation, et il est soumis à phosphorylation.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène a été conçu contre le domaine extracellulaire (acides aminés 30–114), cet anticorps est donc supposé reconnaître la conformation native de surface de CD50 sur les cellules vivantes. Il est recommandé d'utiliser des contrôles isotypiques appropriés et des colorants de viabilité en cytométrie en flux pour sélectionner les cellules vivantes individuelles.
• Réalisez un titrage de l'anticorps pour déterminer la concentration de coloration optimale pour votre type de cellule et vos conditions expérimentales spécifiques. Une plage de départ de 0,5 à 5 µg par million de cellules est typique pour les anticorps conjugués.
• CD50 étant exprimé sur tous les leucocytes quiescents, validez l'anticorps sur des populations cellulaires positives et négatives connues (par exemple, lymphocytes du sang périphérique vs cellules endothéliales).
• Pour la coloration intracellulaire, une étape de fixation / perméabilisation est nécessaire ; cependant, notez que cet anticorps cible un épitope extracellulaire et peut donner de meilleurs résultats pour la coloration de surface sur cellules non fixées.

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