Anticorps polyclonal de lapin anti-CD5 pour WB, IHC-P, ELISA - P06127

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD5

• Le CD5, également appelé T1 ou Leu-1, est un récepteur transmembranaire spécifique aux lymphocytes, caractérisé par trois domaines extracellulaires riches en cystéine du récepteur « scavenger » (SRCR), une seule hélice transmembranaire et une queue cytoplasmique impliquée dans la transduction du signal.
• Il est principalement exprimé sur toutes les cellules T et un sous-ensemble de cellules B B1a, jouant un rôle crucial dans la modulation de la signalisation du récepteur des cellules T (TCR) et du récepteur des cellules B (BCR), la sélection des thymocytes, la différenciation des effecteurs des cellules T et la tolérance immunitaire.
• Le CD5 sert de régulateur négatif de la signalisation du TCR en interagissant avec des molécules de signalisation clés telles que LCK, CD3ζ, PI3K et CBL. Lors de la co-engagement du CD3, la phosphorylation de CBL est renforcée, ce qui favorise la phosphorylation de VAV1 et sa dégradation ultérieure. Références connexes : PMID:1384049 PMID:1385158 PMID:23376399
• Par le biais d'interactions avec des ligands tels que CD5L et CD72 sur les cellules B, le CD5 facilite l'activation des cellules B dépendante des cellules T et médiée par le contact, et aide à maintenir l'homéostasie des cellules T et B régulatrices.
• Dans les cellules B, la signalisation du CD5 conduit à l'activation d'ERK1/2 via le canal calcique TRPC1, entraînant la production d'IL-10 et la modulation des fonctions effectrices des cellules B. Références connexes : PMID:27499044
• La protéine CD5 se localise à la membrane cellulaire et subit des modifications post-traductionnelles, y compris la glycosylation N-liée et la phosphorylation, qui régulent sa stabilité et son activité de signalisation.
• Les mots-clés associés au CD5 incluent récepteur, réponse immunitaire, pont disulfure, glycoprotéine et phosphoprotéine, soulignant son rôle multifacette dans la régulation immunitaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé pour générer cet anticorps polyclonal de lapin correspond aux acides aminés 158–371 du CD5 humain, ce qui couvre une partie du domaine extracellulaire. Cette conception peut favoriser la détection du CD5 de surface dans les applications d'immunohistochimie (IHC-P).
• Pour le Western blot (WB), une bande d'environ 55 kDa est attendue. L'optimisation de la préparation des échantillons, de la quantité chargée et de la dilution de l'anticorps (par exemple, 1:500–1:2000) est recommandée en utilisant des lignées cellulaires de contrôle positif telles que Jurkat (leucémie à cellules T humaines) ou des splénocytes de souris.
• En IHC-P, la méthode de récupération de l'antigène et le titrage de l'anticorps doivent être déterminés empiriquement. La réactivité croisée avec le CD5 de souris et de rat permet l'utilisation de l'anticorps dans des systèmes modèles de rongeurs courants.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection. Envisagez de l'utiliser en association avec une paire d'anticorps correspondante si une analyse quantitative est requise. Validez les effets de matrice et la spécificité à l'aide de la protéine CD5 recombinante ou de lysats cellulaires.

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