Anticorps monoclonal de lapin anti-CD5 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P06127

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CD5

• CD5 (Cluster of Differentiation 5), également connu sous les noms T1/Leu-1, est une glycoprotéine transmembranaire de type I appartenant à la superfamille des récepteurs charognards riches en cystéines (SRCR).
• Il est exprimé sur tous les lymphocytes T et sur un sous-ensemble de lymphocytes B (cellules B1a), où il fonctionne comme un récepteur spécifique des cellules lymphoïdes régulant la signalisation des TCR et des BCR, la sélection des thymocytes et la tolérance immunitaire.
• CD5 agit comme un régulateur négatif de la signalisation du TCR en s’associant à des molécules clés de signalisation telles que LCK, la chaîne CD3Z, PI3K et CBL.
  Références associées : PMID:1384049, PMID:1385158
• Lors de son co-engagement avec CD3, CD5 renforce le recrutement de CBL, entraînant une augmentation de la phosphorylation et de la dégradation de VAV1, modulant ainsi l’intensité du signal.
  Références associées : PMID:23376399
• Dans les lymphocytes B, CD5 déclenche une voie d’activation d’ERK1/2 dépendante du Ca(2+) via le canal calcique non sélectif TRPC1, ce qui entraîne la production d’IL-10.
  Références associées : PMID:27499044
• CD5 interagit avec des ligands tels que CD5L et CD72 sur les lymphocytes B, facilitant l’activation des lymphocytes B dépendante des lymphocytes T par contact et maintenant l’homéostasie des lymphocytes T et B régulateurs.
• Au niveau subcellulaire, CD5 est localisé sur la membrane cellulaire.
• La protéine subit une phosphorylation et une glycosylation, contient des ponts disulfure, un peptide signal, une hélice transmembranaire et des répétitions SRCR. Son poids moléculaire prédit est d’environ 55 kDa.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond aux acides aminés 1–100 du CD5 humain et englobe une partie de la région extracellulaire ; cette conception peut favoriser la reconnaissance de la protéine native dans diverses applications.
• Pour le Western blot, envisagez d’utiliser des lysats cellulaires totaux de lignées de lymphocytes T humains (par exemple, Jurkat) ou de cellules B1a ; la bande attendue est d’environ 55 kDa.
• Pour l’IHC-P, optimisez la récupération antigénique et la fixation en utilisant des tissus riches en lymphocytes T, tels que les ganglions lymphatiques ou la rate.
• Pour l’IF/ICC, testez à la fois la fixation au paraformaldéhyde et au méthanol, ainsi que différentes conditions de perméabilisation, afin de garantir une coloration membranaire appropriée.
• Validez les performances de l’ELISA avec le peptide immunisant ou une protéine CD5 recombinante comme étalon.

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