Anticorps monoclonal de lapin anti-CD45 pour IF/ICC, IHC-P, FC, ELISA - P06800

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD45

• CD45, également appelée antigène commun des leucocytes (L-CA), Ly-5 ou T200, est une tyrosine-protéine phosphatase de type récepteur C codée par le gène Ptprc chez la souris. C'est une glycoprotéine transmembranaire d'un poids moléculaire d'environ 145 kDa.
• CD45 est essentielle pour l'activation des lymphocytes T via le récepteur d'antigène. Elle agit comme régulateur positif de la coactivation des lymphocytes T après liaison à DPP4.
• La région intracellulaire contient deux domaines tandem de tyrosine protéine phosphatase (PTP). Le premier domaine possède une activité catalytique, tandis que le second module la spécificité du substrat.
• Lors de l'activation des lymphocytes T, CD45 recrute et déphosphoryle des molécules de signalisation telles que SKAP1 et FYN, et déphosphoryle également LYN pour moduler son activité.
• CD45 interagit avec CLEC10A au site de contact entre les cellules présentatrices d'antigène et les lymphocytes T. Cette interaction, impliquant CD45 portant l'antigène Tn sur les lymphocytes T effecteurs et CLEC10A sur les cellules dendritiques immatures, aide à réguler les seuils d'activation des lymphocytes T pour prévenir l'autoréactivité.
• La protéine se localise sur la membrane cellulaire, les radeaux lipidiques et les synapses immunologiques, ce qui est cohérent avec son rôle dans la signalisation proximale. Les modifications post-traductionnelles incluent l'épissage alternatif et la phosphorylation.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 26 à 566 de CD45 de souris (région extracellulaire), ce qui suggère que l'anticorps reconnaît probablement un épitope extracellulaire. Il est donc parfaitement adapté pour la coloration de cellules vivantes et la cytométrie en flux sans perméabilisation.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC) et l'immunohistochimie (IHC-P), pensez à optimiser les conditions de fixation (par exemple, 4 % de PFA) et, si nécessaire, utilisez une perméabilisation douce pour garantir l'accès de l'anticorps tout en préservant l'intégrité de l'épitope.
• Lors de la cytométrie en flux (FC), titrez l'anticorps pour déterminer la concentration optimale pour votre type de cellule de souris spécifique, et incluez des contrôles d'isotype appropriés.
• Cet anticorps est validé pour une utilisation sur des échantillons de souris. La réactivité croisée avec d'autres espèces n'a pas été rapportée ; vérifiez-la dans votre système si nécessaire.

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