Anticorps monoclonal lapin anti-CD45 pour FC, ELISA - P08575

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD45

• Le CD45, également connu sous le nom d'antigène commun des leucocytes (L-CA) ou T200, est une phosphatase protéique tyrosine de type récepteur (PTPRC) qui joue un rôle critique dans la signalisation des cellules immunitaires.
• Il fonctionne comme un régulateur positif de la coactivation des lymphocytes T lors de sa liaison à DPP4. Le premier domaine PTPase possède une activité enzymatique, tandis que le second semble affecter la spécificité de substrat du premier. Lors de l'activation des lymphocytes T, il recrute et déphosphoryle SKAP1 et FYN. Il déphosphoryle LYN, modulant ainsi l'activité de LYN. Références connexes : PMID:35767951
• Le CD45 interagit avec CLEC10A à l'interface cellule présentatrice d'antigène–lymphocyte T, contribuant à la modulation des seuils d'activation des lymphocytes T et prévenant l'auto-réactivité.
• Les isoformes résultant de l'épissage alternatif (allant de l'isoforme 1 à 8) sont exprimées de manière différentielle dans les thymocytes, les isoformes 1,2,3,5,7 étant détectées et d'autres non. Les multiples poids protéiques (131–147 kDa) reflètent cette diversité d'isoformes.
• Au niveau subcellulaire, le CD45 se localise à la membrane cellulaire, aux radeaux membranaires et à la synapse immunologique, ce qui est cohérent avec son rôle dans la signalisation proximale du récepteur des lymphocytes T.
• En tant que facteur hôte, le CD45 agit comme un récepteur pour la protéine UL11 du cytomégalovirus humain, assurant la liaison virale aux lymphocytes T et l'altération ultérieure de la prolifération et de la signalisation des lymphocytes T.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent une glycosylation importante, la phosphorylation et la présence d'un peptide signal, d'une hélice transmembranaire et de domaines phosphatases en tandem.
• Largement exprimé sur toutes les cellules hématopoïétiques nucléées, le CD45 est essentiel au développement et à l'activation des lymphocytes, ce qui en fait un marqueur diagnostique clé pour l'identification des leucocytes.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène utilisé (acides aminés 26–577) couvre la région extracellulaire du CD45 humain, incluant plusieurs domaines spécifiques aux isoformes ; cette large région suggère que l'anticorps pourrait reconnaître diverses isoformes du CD45 dans leur conformation native.
• Pour la cytométrie en flux (FC), envisagez de titrer l'anticorps sur des sous-ensembles de leucocytes humains pertinents (par exemple, PBMC, cellules Jurkat) pour déterminer les concentrations optimales de coloration ; incluez des contrôles d'isotype pour évaluer la liaison non spécifique.
• Pour les applications ELISA, évaluez les formats direct ou de capture en utilisant la protéine CD45 recombinante ou des lysats cellulaires ; confirmez la linéarité et la sensibilité avec des courbes standards.
• Puisque le CD45 est fortement glycosylé, assurez-vous que la liaison de l'anticorps n'est pas entravée par la glycosylation dans certains types d'échantillons ; les conditions dénaturantes peuvent affecter l'accessibilité de l'épitope.
• L'anticorps est fourni sur glace ; aliquotez et stockez aux températures recommandées (par exemple, -20°C) pour maintenir la stabilité et éviter les cycles répétés de congélation-décongélation.

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