Anticorps Monoclonaux Anti-CD45 pour WB, IHC-P, mIHC, ELISA - P08575

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du CD45

• Le CD45, officiellement désigné phosphatase protéique tyrosine de type récepteur C (PTPRC), est également connu sous le nom d'antigène commun des leucocytes (L-CA), T200 et B220 (dans son contexte spécifique d'isoforme). C'est une glycoprotéine transmembranaire clé exprimée sur toutes les cellules hématopoïétiques nucléées.
• Cette phosphatase est essentielle à l'activation des cellules T et agit comme un régulateur positif de la co-activation des cellules T lors de sa liaison à DPP4. Son premier domaine de phosphatase possède une activité enzymatique, tandis que le second module la spécificité du substrat. Lors de l'activation des cellules T, le CD45 recrute et déphosphoryle des molécules de signalisation telles que SKAP1, FYN et LYN. Références connexes : PMID:35767951
• Dans le contexte d'une infection microbienne, le CD45 fonctionne comme un récepteur pour la protéine UL11 du cytomégalovirus humain, assurant la médiation de la liaison UL11 aux cellules T. Cette interaction entraîne une réduction de la phosphorylation tyrosine des protéines de signalisation lors de la stimulation du TCR et une prolifération altérée des cellules T.
• À l'échelle subcellulaire, le CD45 se localise à la membrane cellulaire, avec un enrichissement dans les radeaux membranaires et à la synapse immunologique, soulignant son rôle dans les événements de signalisation proximale.
• Le gène PTPRC subit un épissage alternatif étendu, donnant naissance à plusieurs isoformes (par exemple, isoformes 1 à 8) qui présentent des motifs d'expression spécifiques aux tissus distincts, en particulier dans les thymocytes.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la N-glycosylation et la phosphorylation, et les mutations de PTPRC sont liées à une immunodéficience combinée sévère (SCID).

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• Pour le Western blot, tenez compte du poids moléculaire élevé (~147 kDa) en utilisant un gel SDS-PAGE à faible pourcentage approprié et des conditions de transfert prolongées. Incluez un lysat de contrôle positif provenant d'une lignée cellulaire de leucocytes humains (par exemple, Jurkat) pour vérifier la spécificité de la bande.
• Dans IHC-P et mIHC, optimisez la récupération de l'antigène (par exemple, récupération de l'épitope induite par la chaleur) et titrez la concentration de l'anticorps, car la réactivité est spécifique à l'humain. Effectuez une contre-coloration avec un colorant nucléaire pour visualiser la morphologie cellulaire.
• Pour l'ELISA, cet anticorps monoclonal peut servir de réactif de détection ; envisagez de le coupler avec un anticorps de capture qui reconnaît un épitope CD45 non chevauchant si vous développez un dosage de type sandwich.

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