Anticorps monoclonal de lapin anti-CD44 (Validé KO) pour WB, IHC-P, IF/ICC, FC, ELISA - P16070

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD44

• CD44 est une protéine membranaire de type I à passage unique qui sert de récepteur principal pour l'hyaluronane (HA) et interagit également avec le collagène, les facteurs de croissance, les cytokines et les protéases, permettant aux cellules de détecter et de répondre aux changements du microenvironnement tissulaire. Références associées : PMID:16541107, PMID:19703720, PMID:22726066, PMID:18757307, PMID:23589287
• CD44 médie l'activation lymphocytaire, le homing et la recirculation, ainsi que l'hématopoïèse et les réponses inflammatoires aux infections bactériennes. Références associées : PMID:7528188
• La signalisation intracellulaire de CD44 implique l'assemblage de complexes protéiques avec des kinases réceptrices et des protéases membranaires, conduisant à l'activation de PKN2, RAC1, RHOA et de la phospholipase C, qui favorisent la réorganisation du cytosquelette et la mobilisation du calcium. Références associées : PMID:18757307, PMID:23589287, PMID:15123640
• La protéine se localise principalement à la membrane plasmique et aux microvillosités, mais un ectodomaine soluble peut être libéré dans l'espace extracellulaire.
• L'épissage alternatif génère de multiples isoformes ; l'isoforme épithéliale 10 (CD44v) est fortement exprimée dans les carcinomes, tandis que les cellules de neuroblastome répriment son expression.
• Au niveau protéique, CD44 est détecté dans les fibroblastes, l'urine et le placenta. Références associées : PMID:25326458, PMID:36213313, PMID:37453717, PMID:32337544
• La protéine est fortement modifiée par glycosylation, phosphorylation et addition de protéoglycanes, et présente des ponts disulfure ; elle est également impliquée dans l'internalisation du virus de la fièvre aphteuse.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène englobe le domaine de liaison à l'hyaluronane N-terminal (aa 20–178), qui est conservé et exposé en surface ; cet anticorps peut donc détecter de multiples isoformes de CD44 et des conformations natives dans des applications telles que WB et IF/ICC.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 82 kDa, mais une glycosylation extensive peut entraîner un profil de bandes diffus ou en échelle ; envisagez un prétraitement avec la PNGase F ou d'autres déglycosylases pour confirmer la spécificité.
• En immunohistochimie et immunofluorescence, validez la spécificité en utilisant des lignées cellulaires/tissus témoins avec knockdown ou knockout de CD44 pour confirmer les profils de marquage.
• Pour la cytométrie en flux, optimisez le titrage de l'anticorps et incluez des témoins isotypiques pour quantifier avec précision l'expression de CD44 sur les sous-populations lymphocytaires, les cellules carcinomateuses ou d'autres populations pertinentes.
• Étant donné le clivage de l'ectodomaine de CD44, la préparation des échantillons pour les dosages ELISA doit prendre en compte s'il faut détecter le CD44 soluble total ou des isoformes spécifiques ; incluez des étalons appropriés et des étapes de blocage.

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