Anticorps polyclonal de lapin anti-CD40L pour WB et ELISA - P29965

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la CD40L

• La CD40L agit comme un ligand de cytokine essentiel pour CD40 (TNFRSF5) sur les cellules présentatrices d'antigènes, indispensable à l'immunité humorale dépendante des lymphocytes T (PubMed:1280226, PubMed:31331973). Références associées : PMID:1280226 PMID:31331973
• Elle fournit des signaux de costimulation aux lymphocytes T, améliorant la prolifération et la production de cytokines telles que l'IL-4 et l'IL-10 après la liaison du TCR/CD3 et la costimulation par CD28 (PubMed:8617933). Références associées : PMID:8617933
• La réticulation de CD40L déclenche la voie NF-kappa-B et l'activation des kinases MAPK8 et PAK2, et induit la phosphorylation tyrosine de l'isoforme 3 de CD28 dans les lymphocytes T (PubMed:15067037). Références associées : PMID:15067037
• Elle médie la prolifération des lymphocytes B, le changement de classe des immunoglobulines et la production d'IgE en présence d'IL-4, soulignant son rôle dans l'activation des lymphocytes B.
• La CD40L est également un ligand d'intégrine pour ITGA5:ITGB1 et ITGAV:ITGB3, agissant de concert avec CD40 pour réguler les résultats de signalisation tels que l'activation des lymphocytes B et les réponses anti-apoptotiques.
• La protéine est localisée au niveau de la membrane cellulaire et de la surface cellulaire, et peut être clivée pour produire une forme sécrétée ; elle est spécifiquement exprimée sur les lymphocytes T CD4+ activés.
• Avec une masse moléculaire calculée d'environ 29,3 kDa, la glycosylation augmente la taille observée à environ 33–39 kDa dans sa forme active complète.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 113–261, couvrant le domaine d'homologie TNF extracellulaire essentiel à la liaison au récepteur ; cette conception peut conférer une réactivité à la fois aux formes membranaires et solubles de la CD40L.
• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire prédit de la CD40L non glycosylée est d'environ 29 kDa, mais les formes glycosylées peuvent apparaître autour de 33–39 kDa ; vérifiez la spécificité de la bande en utilisant des lysats de lymphocytes T activés ou des contrôles de protéines recombinantes.
• Pour les applications ELISA, envisagez d'utiliser l'anticorps comme réactif de capture ou de détection, associé à une paire d'anticorps appariés validée pour CD40L, et optimisez le revêtement avec de la CD40L recombinante ou des tests cellulaires.
• La réactivité croisée a été rapportée avec la CD40L humaine et murine ; validez-la dans l'espèce et le système de test sélectionnés avant utilisation.

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