Anticorps polyclonal de lapin anti-CD40 pour WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P25942

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CD40

• CD40, également connu sous le nom de membre 5 de la superfamille des récepteurs du facteur de nécrose tumorale (TNFRSF5), Bp50 ou CDw40, est un récepteur de surface cellulaire principalement exprimé sur les cellules B et les carcinomes primitifs.
• Il agit comme récepteur du ligand de CD40 (TNFSF5/CD40LG), déclenchant des cascades de signalisation intracellulaire impliquant TRAF6 et MAP3K8, activant finalement ERK et favorisant la sécrétion d'immunoglobulines. Références associées : PMID:31331973
• CD40 est principalement localisé sur la membrane cellulaire, mais une isoforme sécrétée issue d'un épissage alternatif a également été identifiée.
• La protéine contient plusieurs motifs structuraux essentiels à sa fonction, notamment un peptide signal, une hélice transmembranaire, des ponts disulfure et des sites de glycosylation.
• CD40 joue un rôle central dans l'immunité humorale en favorisant l'activation, la prolifération et la différenciation des cellules B.
• Des variants du gène CD40 ont été associés à des phénotypes pathologiques, soulignant son importance dans la régulation immunitaire.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène de cet anticorps polyclonal de lapin comprend un fragment recombinant couvrant les acides aminés 198–277 du CD40 humain, une région probablement extracellulaire et proche de la membrane ; cette conception peut permettre la reconnaissance des formes natives et dénaturées.
• Pour les applications de Western blot, utiliser une préparation standard des échantillons avec réduction et dénaturation. Valider l'anticorps sur des lignées de cellules B humaines (par exemple Ramos, Raji) ou des lysats de splénocytes murins. La bande prédite est d'environ 31 kDa.
• En immunofluorescence et en immunohistochimie, prévoir un profil de marquage membranaire. Optimiser la récupération antigénique pour les tissus inclus en paraffine et envisager des étapes de blocage appropriées afin de réduire le bruit de fond non spécifique.
• Pour l'ELISA, cet anticorps polyclonal peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection, mais son association avec un anticorps monoclonal validé peut améliorer la spécificité de l'analyse. Il est recommandé de titrer l'anticorps pour chaque nouvelle application.

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