Anticorps monoclonal anti-CD4 pour la cytométrie en flux - P01730

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation du CD4

• Le CD4 est une glycoprotéine transmembranaire appartenant à la superfamille des immunoglobulines. Il se compose d’une région extracellulaire comprenant quatre domaines de type Ig (D1–D4), d’une hélice transmembranaire à passage unique et d’une courte queue cytoplasmique. Il est principalement exprimé à la surface des lymphocytes T auxiliaires, ainsi que des monocytes, des macrophages, des cellules dendritiques et des cellules NK.
• Dans les lymphocytes T auxiliaires, le CD4 agit comme corécepteur des molécules du CMH de classe II. Il se lie aux régions non polymorphes du CMH de classe II sur les cellules présentatrices d’antigène, stabilisant l’interaction entre le récepteur des lymphocytes T (TCR) et les complexes peptide-CMH, ce qui est essentiel à la reconnaissance de l’antigène et à l’activation des lymphocytes T.
• Lors de l’engagement du TCR, le CD4 recrute la kinase de la famille Src LCK, via sa queue cytoplasmique, à proximité du complexe TCR-CD3. La LCK phosphoryle les motifs d’activation à base de tyrosine des immunorécepteurs (ITAM) sur les chaînes CD3, initiant des cascades de signalisation intracellulaire qui entraînent la prolifération des lymphocytes T, la production de cytokines et la différenciation cellulaire.
• En plus de son rôle dans l’immunité adaptative, le CD4 agit comme récepteur principal du virus de l’immunodéficience humaine de type 1 (VIH-1) par interaction avec la glycoprotéine d’enveloppe virale gp120. Il sert également de récepteur à l’herpèsvirus humain 7 (HHV-7). Les protéines Vpu et Nef du VIH-1 diminuent l’expression du CD4 à la surface cellulaire afin de faciliter la libération virale et l’évasion immunitaire. Références associées : PMID:12089508 PMID:16331979 PMID:2214026 PMID:17346169 PMID:7909607
• Le CD4 est modifié post-traductionnellement par glycosylation liée à l’azote, formation de ponts disulfure, palmitoylation au niveau d’une cystéine juxtamembranaire et phosphorylation par la LCK. Ces modifications régulent le repliement de la protéine, sa localisation membranaire et la transduction du signal.
• L’expression du CD4 est une caractéristique définissant les lymphocytes T auxiliaires et il est couramment utilisé comme marqueur immunophénotypique pour l’identification des sous-populations de lymphocytes T. Sa densité à la surface peut varier selon l’état d’activation et de différenciation cellulaire.
• Dans les macrophages et les cellules NK, l’engagement du CD4 peut déclencher la différenciation, l’expression de cytokines et la migration cellulaire par des voies indépendantes du TCR et de la LCK, soulignant sa polyvalence fonctionnelle au-delà de la signalisation des lymphocytes T.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Cet anticorps est directement conjugué à , un fluorophore rouge lointain brillant et photostable, prêt à l’emploi pour la cytométrie en flux. Titrer l’anticorps afin de déterminer la concentration de marquage optimale pour votre type cellulaire et vos conditions expérimentales spécifiques (plage typique : 0,1–1 µg pour 1×10^6 cellules).
• Étant donné que l’expression du CD4 à la surface est élevée sur les lymphocytes T auxiliaires au repos, inclure des contrôles d’isotype appropriés ainsi qu’une discrimination des cellules vivantes et mortes afin de garantir un marquage spécifique. Pour les panels multiparamétriques, associer cet anticorps à des anticorps anti-CD3 et anti-CD8 afin d’analyser en détail les sous-populations de lymphocytes T.
• L’anticorps présente une réactivité croisée avec le CD4 humain et le CD4 de cynomolgus, ce qui le rend adapté aux études impliquant des modèles de primates non humains. Valider l’anticorps dans votre matrice d’échantillon spécifique ainsi qu’avec votre protocole de fixation/perméabilisation si un marquage intracellulaire est requis.
• L’immunogène est constitué de CD4 humain recombinant, correspondant probablement au domaine extracellulaire. Par conséquent, l’anticorps peut reconnaître préférentiellement le CD4 natif non dénaturé ; les conditions dénaturantes (par exemple, en western blot dans des conditions réductrices) peuvent nécessiter une validation.
• Pour les applications autres que la cytométrie en flux, telles que l’immunohistochimie ou l’immunoprécipitation, une optimisation et une vérification indépendante sont recommandées en raison de l’absence de données du fabricant.

CamelBio : votre passerelle d’approvisionnement tout-en-un

CamelBio accompagne les fabricants de dispositifs de diagnostic et les laboratoires de recherche en proposant une gamme complète de matières premières pour le diagnostic in vitro, comprenant des anticorps validés, des paires d’antigènes et des réactifs auxiliaires. Cet anticorps anti-CD4 prend en charge l’immunophénotypage des lymphocytes T et la recherche liée au VIH ; sa réactivité démontrée dans des échantillons humains et de cynomolgus le positionne comme un outil adapté au développement d’immunodosages translationnels. Au-delà des réactifs individuels, CamelBio facilite l’approvisionnement en matières premières ciblant des molécules rares ainsi que les commandes personnalisées en vrac, vous aidant à rationaliser l’ensemble de votre flux de travail, de la conception de l’essai à la validation clinique.