Anticorps monoclonal de lapin anti-CD3G pour WB - P09693

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD3G

• CD3G est la chaîne gamma du co-récepteur CD3 des cellules T, un membre de la superfamille des immunoglobulines et un composant central du complexe TCR-CD3 sur les lymphocytes T.
• Le complexe TCR-CD3 est central pour l'immunité adaptative ; lors de la reconnaissance de l'antigène, les chaînes CD3 (CD3D, CD3E, CD3G et CD247) transmettent des signaux d'activation via leurs motifs d'activation à base de tyrosine (ITAM) cytoplasmiques. Ces ITAM sont phosphorylés par les kinases de la famille Src LCK et FYN, initiant des cascades de signalisation en aval (PubMed:2470098). Références associées : PMID:2470098
• CD3G est nécessaire pour la régulation dynamique de l'expression du TCR à la surface cellulaire. Son domaine cytoplasmique contient un motif de tri basé sur une di-leucine (diL) qui contrôle le recyclage constitutif du TCR, assurant des niveaux appropriés du récepteur sur la membrane plasmique (PubMed:8187769). Références associées : PMID:8187769
• La protéine est une protéine membranaire de type I à passage unique, localisée à la membrane cellulaire, avec un peptide signal, un domaine extracellulaire de type immunoglobuline, une hélice transmembranaire et une queue cytoplasmique.
• Les modifications post-traductionnelles clés incluent la phosphorylation des tyrosines ITAM lors de l'activation des cellules T, en faisant une phosphoprotéine.
• CD3G est exprimé sur les lymphocytes T et joue un rôle critique dans le développement et la fonction des cellules T ; des mutations sont associées à l'immunodéficience (IMD17).
• Il contient des ponts disulfure et est une glycoprotéine, avec un poids moléculaire d'environ 20 kDa (calculé 20 469 Da à partir d'UniProt ; observé ~20 kDa par SDS-PAGE).

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène a été conçu contre un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 83–182 du CD3G humain (P09693), couvrant une partie du domaine extracellulaire et potentiellement la région transmembranaire. Cette région est hautement conservée, ce qui soutient la réactivité croisée signalée avec la souris.
• Pour le Western blot, attendez-vous à une bande spécifique d'environ 20 kDa dans des conditions réductrices. Envisagez d'utiliser des lysats de lignées de cellules T (par exemple, Jurkat) comme contrôles positifs.
• En IHC-P et IF/ICC, optimisez les protocoles de récupération antigénique et de perméabilisation, et validez les profils de marquage membranaire dans les tissus riches en cellules T (par exemple, ganglion lymphatique, rate).
• Pour l'ELISA, évaluez l'anticorps comme réactif de capture ou de détection après avoir confirmé sa réactivité dans votre système de test.
• Comme pour tout anticorps, réalisez des contrôles appropriés et titrez l'anticorps pour déterminer les dilutions de travail optimales pour votre configuration expérimentale spécifique.

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