Anticorps polyclonal de lapin anti-CD3D pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P04234

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CD3D

• Le gène CD3D code la chaîne delta de la glycoprotéine de surface des lymphocytes T CD3, également appelée chaîne delta T3 du récepteur des lymphocytes T. Il s’agit d’une protéine membranaire de type I à passage unique, qui constitue un élément essentiel du complexe TCR-CD3.
• En tant que composant du complexe TCR-CD3, CD3D est essentiel à l’immunité adaptative. Lors de la reconnaissance de l’antigène par le TCR, les chaînes CD3 transmettent les signaux d’activation à travers la membrane cellulaire par l’intermédiaire de leurs motifs d’activation à base de tyrosine des immunorécepteurs (ITAM). Ces ITAM sont phosphorylés par les kinases de la famille Src LCK et FYN, ce qui initie des cascades de signalisation en aval (PubMed:2470098). Références associées : PMID:2470098
• CD3D joue un rôle essentiel dans la différenciation des thymocytes en assurant l’assemblage correct du complexe TCR-CD3 et son expression à la surface cellulaire. Il interagit également avec les corécepteurs CD4 et CD8, établissant un lien fonctionnel entre le TCR et ces corécepteurs, nécessaire à la sélection positive des lymphocytes T CD4+ et CD8+ (PubMed:12215456). Références associées : PMID:12215456
• Au niveau subcellulaire, CD3D est localisé sur la membrane cellulaire, ce qui est cohérent avec sa fonction de récepteur de signalisation transmembranaire.
• CD3D est principalement exprimé sur les lymphocytes T avec les autres composants du TCR-CD3. Il est également présent sur les cellules NK fœtales, ce qui indique un rôle plus large dans le développement des lymphocytes.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation des ITAM, la glycosylation liée à l’azote et la formation de ponts disulfure, toutes essentielles à sa structure et à ses fonctions de signalisation.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Pour le Western blot, tenez compte du fait que l’immunogène correspond aux acides aminés 22–105 de la région extracellulaire ; une bande proche de 19 kDa est attendue. Utilisez un contrôle positif approprié, tel qu’un lysat de cellules Jurkat.
• Pour l’IHC-P, optimisez les conditions de récupération antigénique et validez la coloration à l’aide de tissus connus pour être riches en lymphocytes T (par exemple, amygdale ou ganglion lymphatique).
• Pour l’IF/ICC, une perméabilisation est nécessaire pour détecter CD3D, et une double coloration avec CD4/CD8 peut aider à confirmer la spécificité vis-à-vis des lymphocytes T. Validez le protocole dans votre système d’échantillons.
• Pour l’ELISA, utilisez l’anticorps comme réactif de capture ou de détection après avoir confirmé ses performances avec du CD3D recombinant ou des lysats cellulaires ; la réactivité croisée avec le CD3D de rat permet de concevoir des essais multispécifiques.
• En tant qu’anticorps polyclonal de lapin, il peut reconnaître plusieurs épitopes ; il convient donc de confirmer sa spécificité dans chaque application à l’aide de contrôles appropriés par knockout ou knockdown.

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