Anticorps monoclonal anti-CD352/SLAMF6 pour WB, IHC-P, FC, ELISA - Q96DU3

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CD352/SLAMF6

• SLAMF6 (également connu sous les noms NTB-A, Ly108 et CD352) est un membre de la famille des molécules d’activation lymphocytaire de signalisation (SLAM). Il fonctionne comme un récepteur à auto-ligand qui module les réponses immunitaires innées et adaptatives par le biais d’interactions cellule-cellule homotypiques ou hétérotypiques.
• SLAMF6 déclenche une activité cytolytique spécifiquement dans les cellules tueuses naturelles (NK) qui expriment des densités élevées de récepteurs de cytotoxicité naturelle. Références associées : PMID:11489943 PMID:16920955
• La signalisation positive dans les cellules NK implique la phosphorylation de VAV1 et dépend de la protéine adaptatrice SH2D1B/EAT-2. Références associées : PMID:16920955
• Dans les lymphocytes T, SLAMF6 favorise la différenciation vers le phénotype Th17, entraînant une augmentation de la sécrétion d’IL-17 par le recrutement de RORC au niveau du promoteur d’IL-17 ; cette activité de costimulation nécessite SH2D1A/SAP. Références associées : PMID:16920955 PMID:22184727 PMID:22989874
• Avec SLAMF1 et CD84/SLAMF5, SLAMF6 peut agir comme un régulateur négatif de la réponse immunitaire humorale et, en l’absence de SH2D1A/SAP, peut transmettre des signaux inhibiteurs aux lymphocytes T CD4+ et aux cellules NKT.
• SLAMF6 régule négativement la formation des centres germinatifs en inhibant l’adhésion entre les lymphocytes T et les lymphocytes B ; cette fonction est associée à un recrutement accru de la phosphatase PTPN6/SHP-1.
• La protéine est une glycoprotéine membranaire de type I à passage unique, située au niveau de la membrane cellulaire. Elle est exprimée par toutes les cellules NK au repos et activées, ainsi que par les lymphocytes T et B, avec une expression de surface accrue signalée sur les lymphocytes T de patients atteints de lupus érythémateux systémique (LES). Références associées : PMID:11489943 PMID:22184727
• SLAMF6 est soumis à un épissage alternatif, donnant naissance à plusieurs isoformes ; il est modifié par glycosylation liée aux N, formation de ponts disulfure et phosphorylation de résidus tyrosine clés au sein de ses motifs commutateurs à base de tyrosine des récepteurs immunitaires (ITSM).

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond au domaine extracellulaire (acides aminés 24 à 215) du SLAMF6 humain ; l’anticorps monoclonal de lapin devrait reconnaître la protéine native exprimée à la surface cellulaire en cytométrie en flux et peut être adapté à l’immunofluorescence ainsi qu’aux études de blocage fonctionnel.
• Pour le Western blot, prévoir des bandes spécifiques autour de 24 kDa (prédites pour certaines isoformes) et de 37 kDa (formes issues d’un épissage alternatif ou glycosylées) ; valider les poids moléculaires observés dans votre lysat.
• Pour l’immunohistochimie (tissu inclus en paraffine, IHC-P), effectuer une récupération antigénique avec un tampon citrate (pH 6,0) et optimiser la dilution de l’anticorps primaire à l’aide d’un tissu témoin positif connu (par exemple, une amygdale ou un ganglion lymphatique).
• Pour la cytométrie en flux, utiliser 0,5 à 1 µg d’anticorps par million de cellules dans un volume de coloration de 100 µL ; veiller à la viabilité, car SLAMF6 est un marqueur de surface.
• Lors de la mise en place d’un système de détection ELISA, l’associer à une paire d’anticorps de capture/détection compatible ou utiliser cet anticorps monoclonal recombinant comme réactif de détection dans un format sandwich.

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