Anticorps monoclonal anti-CD27 pour WB, IF-P, ELISA - P26842

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD27

• Le CD27 est un récepteur de point de contrôle immunitaire de costimulation appartenant à la superfamille des récepteurs du facteur de nécrose tumorale (TNFRSF7), exprimé à la surface des lymphocytes T, des cellules NK et des lymphocytes B. Références associées : PMID:28011863
• Après liaison à son ligand CD70, le CD27 active l'axe de signalisation TRAF2-PTPN6 qui inhibe la phosphorylation de LCK, favorisant la formation de la mémoire des lymphocytes T et l'adaptation transcriptionnelle. Références associées : PMID:38354704
• La voie CD70-CD27 est essentielle pour l'activation et l'expansion des lymphocytes T spécifiques de l'antigène, ce qui assure la surveillance immunitaire des lymphocytes B. Références associées : PMID:28011863
• Le CD27 fournit une signalisation de rétroaction négative lors de la différenciation des leucocytes, modulant l'hématopoïèse dans l'activation immunitaire.
• Dans le tissu adipeux, le CD27 régule négativement la fonction des lymphocytes Th2, influençant potentiellement l'inflammation métabolique.
• Au niveau subcellulaire, le CD27 se localise à la membrane cellulaire en tant que protéine transmembranaire de type I à passage unique.
• La protéine subit des modifications post-traductionnelles, notamment une N-glycosylation et une phosphorylation, et contient trois ponts disulfure intramoléculaires qui stabilisent son domaine extracellulaire.
• UniProt annote le CD27 avec des mots-clés tels que récepteur, peptide signal, hélice transmembranaire, pont disulfure, glycoprotéine, phosphoprotéine, apoptose et variant pathologique ; il se trouve principalement dans la plupart des lymphocytes T.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 1 à 100 du CD27 humain, ciblant le domaine extracellulaire N-terminal, qui est exposé à la surface cellulaire et impliqué dans la liaison du ligand. Cette conception génère probablement des anticorps qui reconnaissent le CD27 natif exprimé à la surface.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit du CD27 est d'environ 29 kDa ; cependant, en raison de la glycosylation, il peut migrer sous forme de bande diffuse entre 30 et 55 kDa. Validez en utilisant un lysat témoin positif, tel que Jurkat ou d'autres lignées de lymphocytes T.
• Cet anticorps a été testé pour le WB, l'IF-P et l'ELISA avec les espèces humaine et de rat. Pour l'immunofluorescence (IF-P), une perméabilisation est nécessaire pour détecter les épitopes intracellulaires ou pour vérifier la coloration de surface. Incluez toujours des témoins négatifs appropriés.
• Le CD27 peut être libéré de la surface cellulaire après activation, générant du CD27 soluble (sCD27). Si vous détectez le sCD27 par ELISA ou d'autres méthodes, envisagez d'utiliser des surnageants de culture cellulaire ou des échantillons de sérum.
• Pour garantir des performances optimales, stockez l'anticorps à -20°C en aliquotes de travail pour éviter les cycles répétés de congélation-décongélation. L'expédition sur sac de glace indique que l'anticorps est stable dans des conditions de transport froid.

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