Anticorps monoclonal de lapin anti-CD20 pour WB et IHC-P - P11836

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD20

• Protéine membranaire spécifique des lymphocytes B qui joue un rôle dans la régulation de l'influx calcique cellulaire nécessaire au développement, à la différenciation et à l'activation des lymphocytes B. Références associées : PMID:12920111, PMID:3925015, PMID:7684739
• Fonctionne comme un composant du canal calcique activé par le stock (SOC) favorisant l'influx calcique après activation par le récepteur des cellules B/BCR. Références associées : PMID:12920111, PMID:18474602, PMID:7684739
• Localisée à la membrane cellulaire, avec une expression spécifique aux cellules B.
• Contient des modifications post-traductionnelles clés incluant la palmitoylation, la phosphorylation et un pont disulfure ; elle est également classée comme une lipoprotéine.
• Cible pharmaceutique bien établie pour les thérapies de déplétion des cellules B, mise en évidence par son inclusion dans le mot-clé pharmaceutique d'UniProt.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes de la protéine.
• L'isoforme canonique a un poids moléculaire d'environ 33 kDa (masse annotée UniProt : 33 077 Da).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène de cet anticorps est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 100-200 du CD20 humain, une région qui peut inclure des épitopes extracellulaires adaptés à la reconnaissance de l'antigène de surface natif.
• Pour le western blot (WB), une bande proche de 33 kDa est attendue dans les lysats de cellules B ; envisagez d'utiliser des contrôles positifs appropriés (par exemple, lignées cellulaires Raji ou Daudi) et de valider avec des modèles siRNA ou knockout.
• En immunohistochimie (IHC-P), la coloration du CD20 devrait être localisée à la membrane dans les zones de cellules B des tissus lymphoïdes (par exemple, amygdale, ganglion lymphatique) ; optimisez la récupération antigénique et le titrage de l'anticorps pour les coupes fixées au formol et incluses en paraffine.
• Pour la cytométrie en flux (FC) et l'immunofluorescence (IF/ICC), testez sur des lignées de cellules B ou des PBMC primaires ; confirmez la spécificité en utilisant des contrôles isotypiques et vérifiez la réactivité croisée avec le singe cynomolgus comme indiqué.
• Les applications ELISA peuvent nécessiter l'appariement avec un anticorps de détection approprié ; envisagez d'effectuer des titrages en damier et de prendre en compte les effets de matrice potentiels des échantillons de sérum ou de plasma.

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