Anticorps monoclonal de lapin anti-CD18 pour WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P05107

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD18

• CD18 (intégrine bêta-2, ITGB2) est une glycoprotéine transmembranaire de type I qui s'associe à plusieurs sous-unités α (CD11a, CD11b, CD11c, CD11d) pour former des intégrines hétérodimériques : LFA-1 (αLβ2), Mac-1 (αMβ2), p150,95 (αXβ2) et αDβ2 (αDβ2).
• Ces intégrines médient l'adhésion et la transmigration des leucocytes en se liant aux ICAM (1-3), VCAM1, au complément iC3b, au fibrinogène et au facteur X, et jouent un rôle essentiel dans le trafic des cellules immunitaires et leurs fonctions effectrices (PubMed:1676048, PubMed:23775590, PubMed:38195629, PubMed:29100055, PubMed:10438935, PubMed:8777714, PubMed:9841932, PubMed:11812992, PubMed:28807980, PubMed:18587400). Références associées : PMID:1676048, PMID:23775590, PMID:38195629, PMID:29100055, PMID:10438935, PMID:8777714, PMID:9841932, PMID:11812992, PMID:28807980, PMID:18587400
• En tant que récepteur clé de l'élimination des cellules apoptotiques, LFA-1 (αLβ2) coopère avec ICAM3 pour favoriser la phagocytose des neutrophiles apoptotiques par les macrophages (PubMed:23775590). De plus, αXβ2 reconnaît ICAM4 des érythrocytes et ICAM5 des neurones, reliant les intégrines à l'érythrophagocytose et aux interactions neurone-leucocyte (PubMed:16985175, PubMed:10741396). Références associées : PMID:23775590, PMID:16985175, PMID:10741396
• Les intégrines CD18 contribuent à la cytotoxicité des cellules tueuses naturelles (PubMed:15356110). Mac-1 (αMβ2) est nécessaire à l'activation des neutrophiles stimulés par le TNF médiée par CD177‑PRTN3 (PubMed:21193407). Références associées : PMID:15356110, PMID:21193407
• Subcellulairement, CD18 se localise sur la membrane cellulaire et les radeaux membranaires des leucocytes, en particulier des neutrophiles (PubMed:23775590, PubMed:21193407, PubMed:28807980). Références associées : PMID:23775590, PMID:21193407, PMID:28807980
• La protéine est fortement glycosylée, contient des domaines de type EGF et possède des motifs de liaison au calcium et au magnésium essentiels à l'activation de l'intégrine. Elle est modifiée post-traductionnellement par phosphorylation et comporte un acide pyrrolidone carboxylique à son extrémité N-terminale.
• Conformément à son rôle essentiel dans l'adhésion des leucocytes, les mutations de l'ITGB2 sont associées à des immunodéficiences telles que le déficit d'adhésion des leucocytes (LAD) de type I.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond à l'extrémité N-terminale (aa 1–100) de CD18 humain ; vérifiez la réactivité pour l'espèce et l'application prévues à l'aide de lysats de contrôle positif (par exemple, leucocytes humains, de souris ou de rat).
• Pour le Western blot (WB), une bande majoritaire d'environ 85 kDa est attendue ; envisagez d'utiliser des conditions réductrices et une sonde avec des anticorps secondaires appropriés.
• Pour l'immunofluorescence sur paraffine (IF‑P) et l'immunohistochimie sur paraffine (IHC‑P), optimisez la récupération d'antigène (la récupération d'épitopes induite par la chaleur est généralement requise) et titrez l'anticorps primaire pour réduire le bruit de fond.
• Les applications ELISA peuvent nécessiter un revêtement avec l'immunogène recombinant ou des complexes d'intégrine native ; associez-le à un anticorps secondaire de détection pour établir une courbe d'étalonnage.
• En raison de la réactivité croisée avec la souris et le rat, validez la spécificité de l'anticorps dans les systèmes modèles pertinents lors du changement d'espèce.

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