Anticorps polyclonal de lapin anti-CD171/L1CAM pour WB, IF/CC, ELISA - P32004

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD171/L1CAM

• La molécule d'adhésion cellulaire neuronale L1 (L1CAM, également désignée CD171) est une molécule d'adhésion cellulaire de la superfamille des immunoglobulines qui existe sous plusieurs isoformes par épissage alternatif.
• Elle médie la dynamique de l'adhésion cellulaire et génère des signaux transmembranaires au niveau des récepteurs à tyrosine kinase, jouant des rôles essentiels dans le développement et le fonctionnement du système nerveux.
• Pendant le développement cérébral, la L1CAM est essentielle pour la migration neuronale, la croissance axonale et la fasciculation, ainsi que la synaptogenèse ; dans le cerveau adulte, elle contribue à la plasticité synaptique et à la dynamique structurelle.
• La L1CAM se localise sur la membrane plasmique et est enrichie dans les projections neuronales spécialisées, notamment les cônes de croissance, les axones et les dendrites.
• La protéine est une glycophosphoprotéine avec des domaines de type immunoglobuline et des ponts disulfures, et sa phosphorylation régule ses fonctions adhésives et de signalisation.
• Les mutations du gène L1CAM sont associées à un spectre de troubles neurologiques, notamment l'hydrocéphalie liée à l'X, le syndrome MASA, la paraplégie spastique de type 1 et l'agénèse du corps calleux.
• Elle est majoritairement exprimée dans le système nerveux et a été impliquée dans la migration et la différenciation cellulaire au-delà des contextes neuronaux.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Conception de l'immunogène : L'immunogène cible la région C-terminale intracellulaire (acides aminés 1143-1257) de la L1CAM, conservée chez l'homme, la souris et le rat, ce qui confirme la réactivité croisée observée. Cette région n'est pas supposée être glycosylée, donc l'anticorps peut reconnaître à la fois les formes glycosylées et non glycosylées.
• Western blotting : Le poids moléculaire prédit est de 140 kDa, mais une glycosylation extensive décale généralement la bande apparente vers ~200-220 kDa. Utilisez des conditions réductrices et dénaturantes, et validez avec des lysats de cellules cérébrales ou neuronales.
• Immunofluorescence/ICC : La perméabilisation est nécessaire pour détecter l'épitope intracellulaire. Une fixation avec 4 % de PFA et une perméabilisation avec 0,1 % de Triton X-100 sont recommandées. Effectuez une co-coloration avec des marqueurs neuronaux pour confirmer la spécificité dans les neurones et les projections.
• ELISA : L'anticorps peut être utilisé comme réactif de détection dans des formats ELISA directs ou indirects. Pour un ELISA sandwich, associez-le à un anticorps de capture ciblant un épitope distinct. La titration et l'optimisation sont essentielles.

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