Anticorps monoclonal lapin anti-CD163 pour WB, IF-P, ELISA - Q86VB7

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD163 (M130)

• CD163 (également appelé protéine de type récepteur scavenger riche en cystéine M130, M130, MM130, SCARI1) est un récepteur régulé en phase aiguë principalement impliqué dans la clairance des complexes hémoglobine/haptoglobine par les macrophages, protégeant les tissus contre les dommages oxydatifs.
• Il se lie aux complexes hémoglobine/haptoglobine de manière dépendante du calcium et du pH, déclenchant l'endocytose et la dégradation ultérieure de l'hème pour le recyclage du fer, tout induisant également des cascades de signalisation intracellulaire qui favorisent la sécrétion de cytokines (par exemple l'IL6, le CSF1).
• L'isoforme 3 (l'isoforme sanguine prédominante) présente une capacité endocytaire et une expression de surface plus élevées que les autres isoformes.
• La forme soluble (sCD163), générée par clivage, agit comme médiateur anti-inflammatoire et sert de paramètre diagnostique pour le suivi de l'activation des macrophages dans les pathologies inflammatoires.
• CD163 est localisé à la fois sur la membrane cellulaire des monocytes et des macrophages tissulaires matures (par exemple les cellules de Kupffer, les macrophages de la pulpe rouge splénique) et existe sous forme sécrétée.
• Il contient un peptide signal, plusieurs domaines de récepteur scavenger riches en cystéine (SRCR), une région transmembranaire, et est soumis à des modifications post-traductionnelles incluant la glycosylation, la phosphorylation et la formation de ponts disulfure.
• Il est fortement exprimé dans les cellules de Kupffer hépatiques, les macrophages de la pulpe rouge splénique, les macrophages corticaux thymiques, les macrophages résidents de la moelle osseuse et les macrophages méningés.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot (WB), notez que la masse moléculaire prédite est d'environ 125 kDa : ajustez le pourcentage de gel et le temps de transfert en conséquence pour garantir un transfert efficace des protéines de haut poids moléculaire.
• En immunofluorescence sur coupes de paraffine (IF-P), les conditions de démasquage antigénique peuvent influencer l'accessibilité de l'épitope : optimisez la méthode de démasquage antigénique induit par la chaleur (HIER) ou enzymatique en fonction de votre type de tissu.
• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant le domaine cytoplasmique (aa 861-961), qui peut donner de bons résultats pour la détection de protéines totales ; cependant, pour l'ELISA sandwich, testez la compatibilité de couplage avec des anticorps ciblant des épitopes distincts.
• La réactivité croisée étant limitée à l'humain, validez la spécificité du test en utilisant des lignées cellulaires ou des échantillons de tissus humains appropriés, et envisagez des contrôles d'isotype pour les expériences multiplexées.

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