Anticorps monoclonal de lapin anti-CD161 pour WB, IF-P, FC, ELISA - Q12918

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD161

• CD161, codé par le gène KLRB1, est un récepteur de type lectine des cellules tueuses, également connu sous les noms de NKR-P1A, CLEC5B ou HNKR-P1a.
• Il fonctionne comme un récepteur inhibiteur sur les cellules tueuses naturelles (NK) ; son activation stimule la sphingomyélinase acide (SMPD1), augmentant le niveau de céramide intracellulaire et conduisant à l'activation en aval des kinases AKT1 et RPS6KA1.
• L'activation de CD161 améliore considérablement la prolifération des lymphocytes T induite par l'anti-CD3, ce qui indique un rôle co-stimulateur dans certains contextes.
• En tant que lectine de type C, il se lie aux épitopes terminaux Gal-alpha(1,3)Gal et à la N-acétyllactosamine, et interagit également avec le ligand CLEC2D/LLT1 pour inhiber la cytotoxicité médiée par les cellules NK et la sécrétion d'interféron-gamma.
• La protéine est un récepteur membranaire avec une ancre de signal, une seule hélice transmembranaire et un domaine lectine de type C.
• Elle est exprimée dans un sous-ensemble de cellules NK, préférentiellement dans l'épithélium intestinal et le foie, et dans les lymphocytes T du sang périphérique présentant un phénotype antigénique mémoire.
• Les principales caractéristiques structurelles incluent des liaisons disulfure et une glycosylation N-liée, comme l'atteste sa classification de glycoprotéine.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre le domaine extracellulaire (aa 67-225), ce qui suggère que l'anticorps cible probablement la région de liaison au ligand ; prenez cela en compte lors de la conception d'expériences de blocage ou de compétition.
• Pour le Western blot, une bande proche de 25 kDa est attendue ; utilisez des conditions réductrices/dénaturantes et validez avec des contrôles positifs tels que les cellules NK92 ou les PBMC activés.
• En cytométrie en flux, la coloration de surface de CD161 sur les sous-ensembles de cellules NK et T peut nécessiter un blocage du récepteur Fc ; étalonnez l'anticorps par titrage pour optimiser le rapport signal sur bruit.
• Pour l'IF-P, le démasquage antigénique peut être nécessaire ; validez sur des tissus connus pour héberger des lymphocytes CD161+ (par exemple, coupes de foie ou d'intestin).
• La réactivité croisée avec la souris et le rat permet des études précliniques, mais confirmez la réactivité dans votre système modèle spécifique.
• Associez cet anticorps à des contrôles d'isotype appropriés et validez ses performances dans chaque application avec des échantillons biologiques pertinents.

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