Anticorps monoclonal de lapin anti-CD16 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P08637/O75015

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD16

• CD16a (FCGR3A) est un récepteur à faible affinité pour le fragment Fc des IgG, principalement exprimé sur les cellules tueuses naturelles (NK) et un sous-ensemble de monocytes. Il joue un rôle central dans la cytotoxicité cellulaire dépendante des anticorps (ADCC) et la production de cytokines. Références associées : PMID:11711607, PMID:21768335, PMID:22023369, PMID:27670158
• Lors de sa liaison aux cibles opsonisées par les IgG, CD16a déclenche des cascades de signalisation médiées par ITAM, conduisant à l’activation des cellules NK, à la dégranulation et à la lyse des cellules cibles. Ce processus est essentiel pour l’immunité antivirale et la surveillance tumorale. Références associées : PMID:24412922, PMID:25786175, PMID:29967280, PMID:9916693, PMID:1825220, PMID:23024279, PMID:2532305
• CD16a peut également co-stimuler les cellules NK et médier la lyse des cellules cibles indépendamment de la liaison aux IgG, ce qui met en évidence son rôle dans l’activation immunitaire innée. Références associées : PMID:10318937, PMID:23006327
• Le récepteur médie l’efficacité antitumorale des anticorps monoclonaux thérapeutiques, avec une activité accrue observée lors de la liaison aux IgG afucosylées. Références associées : PMID:27670158, PMID:34485821, PMID:28566370
• Dans le contexte de l’infection par le virus de la dengue, CD16a facilite l’amélioration dépendante des anticorps (ADE) en se liant aux complexes IgG1 afucosylée-virus, favorisant l’entrée virale dans les cellules myéloïdes.
• Au niveau sous-cellulaire, CD16a est ancrée à la membrane cellulaire via une hélice transmembranaire et peut également être trouvée sous forme sécrétée. Elle subit une phosphorylation et une glycosylation qui modulent ses fonctions de signalisation.
• L’expression tissulaire est restreinte aux cellules NK et à un sous-ensemble de monocytes, ce qui est confirmé au niveau protéique. Références associées : PMID:2526846, PMID:27670158

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L’immunogène couvre le domaine extracellulaire (acides aminés 20-208) de la CD16b humaine, ce qui suggère que l’anticorps reconnaît un épitope conservé entre CD16a et CD16b. Envisagez de valider directement la réactivité croisée dans votre système modèle.
• Pour le Western blot, une bande proche de 29 kDa (forme non glycosylée) est attendue, mais des traînées de poids moléculaire plus élevé peuvent apparaître en raison de la glycosylation importante. L’utilisation d’un agent réducteur et l’optimisation du pourcentage de gel peuvent améliorer la résolution.
• En IHC-P, attendez-vous à un motif de coloration membranaire ; incluez des contrôles négatifs et positifs appropriés (par exemple, des tissus riches en cellules NK tels que la rate ou l’amygdale).
• Pour l’IF/ICC, les conditions de fixation et de perméabilisation doivent être optimisées pour préserver l’épitope extracellulaire ; la coloration sur cellules vivantes peut également être adaptée pour le CD16 de surface.
• Les applications ELISA peuvent bénéficier d’un appariement avec un anticorps de détection ciblant un épitope distinct ; tenez compte de l’interférence potentielle de liaison des IgG afucosylées dans certains formats de test.

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