Anticorps monoclonal de lapin anti-CD16 pour WB, ELISA - P08637 / O75015

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD16 (FcγRIIIA)

• Le CD16, codé par le gène FCGR3A (récepteur III-A de la région Fc de l'immunoglobuline gamma de faible affinité), est une glycoprotéine transmembranaire également connue sous les noms de CD16a, FcγRIIIα, FcR-10 et récepteur Fc III-2 de l'IgG.
• En tant que récepteur clé du fragment Fc de l'IgG, le CD16 reconnaît les complexes immuns antigène-IgG regroupés et déclenche la cytotoxicité cellulaire dépendante des anticorps (ADCC) dans les cellules tueuses naturelles (NK) et les monocytes. Cette fonction est essentielle pour éliminer les cellules cibles recouvertes d'anticorps lors d'une infection et pour la surveillance tumorale. Références associées : PMID:11711607, PMID:21768335, PMID:22023369
• Au-delà de l'activité cytotoxique, la signalisation du CD16 promeut la génération de cellules NK adaptatives de type mémoire qui produisent des niveaux élevés d'IFNG et présentent des capacités antivirales et antitumorales améliorées. Références associées : PMID:24412922, PMID:25786175
• L'engagement du CD16 entraîne la phosphorylation des adaptateurs contenant des motifs ITAM et l'activation de kinases en aval (par exemple la PI3K) ainsi qu'un flux de calcium intracellulaire, régissant à la fois la production de cytokines et la dégranulation. Références associées : PMID:1825220, PMID:23024279, PMID:2532305
• Le récepteur se localise principalement sur la membrane cellulaire des cellules NK et d'un sous-ensemble de monocytes circulants ; il peut également être libéré sous forme soluble.
• Le CD16 est très pertinent en immunothérapie du cancer, car il médie les effets antitumoraux des anticorps thérapeutiques et répond avec une opsonisation et une ADCC accrues aux glycoformes d'IgG afucosylées. Références associées : PMID:27670158, PMID:34485821, PMID:28566370
• Dans le contexte de l'infection par le virus de la dengue, le CD16 peut contribuer à l'augmentation dépendante des anticorps (ADE), où les complexes d'IgG sous-neutralisants facilitent l'entrée du virus dans les cellules myéloïdes, exacerbant la pathogenèse.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène (protéine recombinante couvrant les acides aminés 20–208 du CD16 humain) correspond à la région extracellulaire ; l'anticorps est donc supposé reconnaître le CD16 natif exprimé à la surface. Les chercheurs peuvent envisager une coloration sur cellules vivantes ou des conditions non dénaturantes pour préserver la conformation native.
• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire prédit du CD16 est d'environ 29 kDa (P08637) ou 26 kDa (O75015), mais la forme glycosylée mature migre souvent plus haut. Validez le profil de bandes observé dans votre système d'échantillon pertinent et incluez des contrôles de déglycosylation appropriés si nécessaire.
• En ELISA, cet anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection. Compte tenu de sa réactivité croisée avec le CD16 de souris, il peut être employé dans des systèmes modèles xénogéniques, mais les utilisateurs doivent confirmer la spécificité et la sensibilité dans leurs propres conditions expérimentales.
• Étant donné que le CD16 est majoritairement exprimé sur les cellules NK et un sous-ensemble de monocytes, des lysats de cellules NK enrichies (par exemple cellules sélectionnées positives pour CD56) ou de lignées cellulaires monocytaires (par exemple THP-1) constituent des contrôles positifs appropriés. Pour l'analyse au niveau tissulaire, gardez à l'esprit que l'expression du CD16 est relativement restreinte et peut nécessiter des méthodes de détection sensibles.

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