Anticorps monoclonal biotinylé anti-CD16 pour FC - P08637 / O75015

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CD16

• CD16 est le récepteur III-A de faible affinité pour la région Fc des immunoglobulines gamma (FCGR3A), également désigné CD16a, Fc-gamma RIII-alpha et FcRIIIa.
• Il fonctionne comme un récepteur du fragment Fc des IgG, activé de manière optimale par des complexes antigène-IgG regroupés à la surface des cellules, afin de médier la cytotoxicité cellulaire dépendante des anticorps (ADCC), sans se lier aux IgG monomériques libres. Références associées : PMID:11711607 PMID:21768335 PMID:22023369
• Dans les cellules NK, la signalisation médiée par CD16 implique la phosphorylation d’adaptateurs contenant des ITAM, l’activation de PI3K et une élévation intracellulaire soutenue du calcium, aboutissant à la libération de cytokines pro-inflammatoires et à la dégranulation. Références associées : PMID:1825220 PMID:23024279 PMID:2532305
• CD16 joue un rôle essentiel dans la survie et la prolifération des cellules NK, ainsi que dans la génération de cellules NK adaptatives de type mémoire, présentant une production accrue d’IFN-γ et une capacité renforcée d’ADCC antivirale. Références associées : PMID:24412922 PMID:25786175 PMID:29967280 PMID:9916693
• Le récepteur contribue également à l’efficacité antitumorale des anticorps monoclonaux thérapeutiques en médiant l’ADCC des cellules tumorales opsonisées par des IgG, une activité accrue étant observée avec les anticorps IgG1 afucosylés. Références associées : PMID:27670158 PMID:34485821 PMID:28566370
• CD16 est principalement exprimé à la surface des cellules NK et d’un sous-ensemble de monocytes circulants, et peut également être présent sous une forme sécrétée. Références associées : PMID:2526846 PMID:27670158
• En outre, CD16 est impliqué dans la pathogenèse du virus de la dengue par le biais de la facilitation dépendante des anticorps, dans laquelle les anticorps IgG1 anti-dengue afucosylés facilitent l’entrée virale dans les cellules myéloïdes.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation liée à l’azote, la formation de ponts disulfure et la phosphorylation, qui régulent la fonction et la signalisation du récepteur.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond au domaine extracellulaire (aa 20-208) du CD16 humain, ce qui suggère que l’anticorps reconnaît un épitope situé dans cette région ; vérifier si nécessaire la réactivité avec les isoformes FCGR3A (P08637) et FCGR3B (O75015).
• Pour la cytométrie en flux, utiliser le marquage à la biotine avec des réactifs secondaires de streptavidine conjugués à un fluorophore ; titrer à la fois l’anticorps primaire et le conjugué de streptavidine afin d’identifier les rapports signal/bruit optimaux.
• Inclure des contrôles isotopiques appropriés et des étapes de blocage des récepteurs Fc afin de réduire les liaisons non spécifiques, en particulier lors de l’analyse de cellules exprimant des récepteurs Fc, telles que les cellules NK et les monocytes.
• Valider l’anticorps dans le système d’échantillon pertinent (par exemple, des cellules mononucléées du sang périphérique humain) et prendre soigneusement en compte les protocoles de fixation et de perméabilisation, car ils peuvent affecter l’accessibilité de l’épitope.

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