Anticorps polyclonal anti-CD152/CTLA-4 pour WB, IHC-P, ELISA - P16410

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CTLA-4

• CTLA-4 (protéine 4 des lymphocytes T cytotoxiques, également connu sous le nom de CD152) est un récepteur inhibiteur transmembranaire membre de la superfamille des immunoglobulines. Il existe sous forme d'homodimère lié par des ponts disulfures, et un épissage alternatif génère une isoforme soluble dépourvue du domaine transmembranaire.
• CTLA-4 agit comme un régulateur négatif majeur des réponses des lymphocytes T en agissant comme récepteur leurre. Il entre en compétition avec le co-récepteur stimulant CD28 pour la liaison aux ligands de la famille B7 que sont CD80 et CD86, avec une affinité considérablement plus élevée, ce qui atténue l'activation des lymphocytes T. Références associées : PMID:11279501 PMID:11279502 PMID:16551244
• La protéine est localisée sur la membrane cellulaire et elle est majoritairement exprimée dans les tissus lymphoïdes, avec les niveaux les plus élevés sur les lymphocytes T activés. L'expression de surface sur les lymphocytes T activés est 30 à 50 fois plus faible que celle de CD28.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation et la phosphorylation, qui modulent la dynamique de surface cellulaire et l'activité de signalisation de la protéine. Le domaine extracellulaire contient un seul domaine de type IgV avec un pont disulfure conservé.
• CTLA-4 est impliqué dans les maladies auto-immunes comme le diabète sucré de type 1 et le lupus érythémateux disséminé (LED), et des variants génétiques sont associés à la susceptibilité à ces pathologies.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond au domaine extracellulaire (acides aminés 36-161) du CTLA-4 humain, ce qui rend cet anticorps adapté à la détection du récepteur natif lié à la membrane. Lors de la conception de vos expériences, prévoyez d'utiliser des lysats de lymphocytes T activés ou des tissus dont l'expression de CTLA-4 est connue comme contrôles positifs.
• Pour le Western blotting (WB), une bande correspondant à environ 25 kDa (forme monomère) peut être observée en conditions réductrices ; notez que la forme homodimère d'environ 50 kDa peut également être visible en conditions non réductrices.
• En immunohistochimie (IHC), une récupération d'antigène avec un tampon citrate (pH 6,0) et une perméabilisation peuvent améliorer la détection. L'anticorps est connu pour avoir une réactivité croisée avec le CTLA-4 de souris et de rat ; cependant, les dilutions de travail optimales doivent être déterminées de manière empirique.
• Pour les applications ELISA, prévoyez d'associer cet anticorps à un anticorps de détection adapté reconnaissant un épitope non chevauchant, et effectuez une validation dans la matrice d'échantillon concernée.

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