Anticorps monoclonal lapin anti-CD141/Thrombomoduline pour IHC-P, IF/ICC, FC, ELISA - P07204

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD141/Thrombomoduline

• La thrombomoduline (également connue sous le nom de Fétomoduline ou CD141) est un récepteur des cellules endothéliales qui joue un rôle critique dans la régulation de l'hémostase, de la coagulation, de la fibrinolyse, de l'inflammation et de l'angiogenèse. Références associées : PMID:10761923

• Elle sert de cofacteur essentiel pour l'activation de la protéine C (PROC) médiée par la thrombine, initiant la voie anticoagulante sur les cellules endothéliales vasculaires. Références associées : PMID:29323190, PMID:33836597, PMID:9395524

• La thrombomoduline accélère l'activation de la carboxypeptidase B2 plasmatique (CPB2/TAFI), qui inhibe la fibrinolyse en éliminant les acides aminés basiques C-terminaux de substrats tels que les kinines et les anaphylatoxines. Références associées : PMID:26663133

• Elle supprime l'inflammation indépendamment de son activité anticoagulante en séquestrant la molécule pro-inflammatoire HMGB1, empêchant son interaction avec les récepteurs cellulaires tels que RAGE. Références associées : PMID:15841214

• La thrombomoduline protège également l'intégrité de la barrière endothéliale en modifiant la spécificité de clivage du récepteur 1 activé par la protéase (PAR1), inhibant ainsi la perméabilité des cellules endothéliales (Par similitude).

• Au niveau subcellulaire, la thrombomoduline est localisée principalement à la membrane plasmique, ce qui est cohérent avec ses fonctions de récepteur.

• La protéine est principalement exprimée dans les cellules endothéliales et subit des modifications post-traductionnelles, notamment la glycosylation, la formation de ponts disulfures et l'hydroxylation.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond au domaine extracellulaire (acides aminés 19–515), qui contient toutes les répétitions de type EGF et le domaine de type lectine ; cette conception permet probablement d'obtenir des anticorps reconnaissant des épitopes natifs accessibles en surface, adaptés à la cytométrie en flux et à l'immunohistochimie.
• Pour l'IHC-P, envisagez de tester plusieurs méthodes de récupération d'antigène (par exemple, récupération d'épitope induite par la chaleur à pH 6 ou 9) et de titrer la concentration de l'anticorps en raison de la variabilité potentielle de la fixation des tissus.
• Pour l'IF/ICC, incluez des étapes de perméabilisation appropriées si vous ciblez des pools intracellulaires, et validez avec un témoin négatif pour confirmer la coloration spécifique à la membrane.
• En cytométrie en flux, utilisez un protocole de coloration sur cellules vivantes avec un anticorps secondaire conjugué à un fluorophore approprié pour minimiser la liaison non spécifique ; vérifiez les performances avec une lignée cellulaire endothéliale positive connue.
• Pour la détection par ELISA de la thrombomoduline soluble dans le plasma ou le sérum, évaluez l'anticorps comme réactif de capture ou de détection dans un format « sandwich », en tenant compte des effets potentiels de la matrice.

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