Anticorps monoclonal de lapin anti-CD14 pour WB - P10810

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CD14

• L’antigène de différenciation des monocytes CD14 (CD14), également appelé glycoprotéine riche en leucine spécifique des cellules myéloïdes, est une glycoprotéine membranaire ancrée par un glycosylphosphatidylinositol (GPI) appartenant à la famille des répétitions riches en leucine (LRR).
• CD14 agit comme corécepteur du lipopolysaccharide bactérien (LPS) en association avec la protéine de liaison au LPS (LBP), en délivrant le LPS au complexe LY96/TLR4 afin d’initier les réponses immunitaires innées (PubMed:16148141).
  Références associées :
  PMID:16148141
• La signalisation en aval via MyD88, TIRAP et TRAF6 entraîne l’activation de NF-kappa-B, la sécrétion de cytokines et la réponse inflammatoire (PubMed:15895089, PubMed:8612135).
  Références associées :
  PMID:15895089, PMID:8612135
• CD14 sert de corécepteur pour les hétérodimères TLR2:TLR6 et TLR2:TLR1 en réponse aux lipopeptides diacylés et triacylés, respectivement ; ces complexes déclenchent la signalisation à partir de la surface cellulaire et sont acheminés vers l’appareil de Golgi selon un mécanisme dépendant des radeaux lipidiques.
• En tant que récepteur accessoire, CD14 se lie aux lipoprotéines LprA, LprG et LpqH de M. tuberculosis en association avec TLR2 et TLR1, modulant ainsi les fonctions des cellules présentatrices d’antigène (PubMed:19362712).
  Références associées :
  PMID:19362712
• CD14 se lie également aux LDL électronégatives (LDL(-)) et assure la médiation de la libération de cytokines induite par les LDL(-).
• La localisation subcellulaire comprend la membrane cellulaire, les radeaux membranaires et l’appareil de Golgi ; CD14 peut également être sécrété sous une forme soluble.
• Détecté au niveau protéique dans les macrophages péritonéaux, les macrophages alvéolaires pulmonaires, les macrophages dendritiques et les macrophages pulmonaires (PubMed:8612135, PubMed:19362712).
  Références associées :
  PMID:8612135, PMID:19362712

Directives expérimentales et conseils techniques

• L’immunogène correspond au domaine extracellulaire (résidus 18 à 345) de CD14 de souris, qui englobe la région des répétitions riches en leucine ; cette conception peut être utile pour détecter les formes membranaires et solubles de CD14.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit de CD14 est d’environ 39 kDa ; cependant, en raison de la glycosylation, la bande observée peut migrer légèrement plus haut. Envisagez d’utiliser un tampon de blocage et de lyse approprié afin de préserver les épitopes.
• La cytométrie en flux peut être utilisée pour analyser l’expression de CD14 à la surface cellulaire des macrophages et des monocytes ; veillez à appliquer une stratégie de fenêtrage appropriée et à utiliser des contrôles d’isotype pour les échantillons de souris.
• L’ELISA peut convenir à la détection de CD14 soluble ou à l’étude des interactions de liaison au LPS ; optimisez les conditions de revêtement et les anticorps de détection selon le format spécifique du test.
• Validez l’anticorps dans le système d’échantillons pertinent, tel que les macrophages péritonéaux de souris ou les populations de macrophages pulmonaires, afin de confirmer sa réactivité et sa spécificité.

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