Anticorps monoclonal de lapin anti-CD117/c-Kit pour WB, FC, ELISA - P05532

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD117/c-Kit

• CD117/c-Kit est un récepteur transmembranaire unique à activité tyrosine-protéine kinase qui se lie spécifiquement au facteur de cellules souches (KITLG/SCF).
• Il joue un rôle régulateur majeur dans l'hématopoïèse, le maintien des cellules souches, la gamétogenèse, le développement des mastocytes et la mélanogenèse.
• Après la fixation du ligand, KIT active de multiples cascades intracellulaires, notamment les voies PI3K/AKT, RAS/MAPK et JAK/STAT, qui régulent la survie, la prolifération et la différenciation cellulaire.
• Le récepteur est principalement localisé sur la membrane cellulaire, mais KIT activé est rapidement internalisé dans le cytoplasme pour l'atténuation ou la dégradation du signal.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes : l'isoforme 3 est principalement exprimée dans les cellules souches hématopoïétiques et les cellules germinales post-méiotiques, tandis que les isoformes 1 et 2 sont présentes dans les stades spermatogéniques précoces et la moelle osseuse.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation induite par le ligand, la glycosylation N-liée et l'ubiquitination, qui ajustent finement la sortie du signal et le renouvellement du récepteur.
• Classé comme proto-oncogène, les mutations gain de fonction de KIT sont impliquées dans les tumeurs stromales gastrointestinales, la mastocytose et d'autres cancers.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot, attendez une bande majeure à environ 109 kDa correspondant au récepteur complet ; un fragment traité d'environ 22 kDa peut également être détecté selon le type de cellule et les conditions de lyse.
• Étant donné que l'immunogène couvre une grande partie du domaine extracellulaire, cet anticorps est parfaitement adapté à la détection par cytométrie en flux du CD117 de surface sur des cellules de souris vivantes non perméabilisées.
• Les performances en ELISA doivent être optimisées avec un format de capture approprié ; envisagez de l'associer à un anticorps de détection qui se lie à un épitope distinct pour éviter la compétition.
• Validez la spécificité de l'anticorps à l'aide d'un contrôle positif connu (par exemple, cellules de moelle osseuse de souris, lignées de mastocytes) et d'un contrôle négatif où l'expression de CD117 est absente ou réduite par extinction.

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