Anticorps monoclonal anti-CD117/c-Kit pour WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P10721

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD117/c-Kit

• Le récepteur du facteur de croissance des mastocytes/cellules souches Kit (également connu sous le nom de SCFR, c-Kit, CD117, PBT) est une tyrosine-protéine kinase codée par le gène KIT, un proto-oncogène avec de multiples isoformes.
• Fonctionne comme récepteur de surface cellulaire pour le facteur des cellules souches (KITLG/SCF) et régule la survie cellulaire, la prolifération, l'hématopoïèse, le maintien des cellules souches, la gamétogenèse, le développement des mastocytes, la migration et la mélanogenèse.
• Après liaison du ligand, KIT s'autophosphoryle et active des cascades de signalisation en aval incluant les voies PI3K/AKT1, RAS/RAF/MAPK, PLCγ/PKC et JAK/STAT.
• Se localise à la membrane cellulaire mais peut également être trouvé dans le cytoplasme, et subit une internalisation et une dégradation induites par le ligand.
• Dans le testicule, détecté dans les spermatogonies de la couche basale et dans les cellules interstitielles de Leydig, mais pas dans les cellules de Sertoli ou les spermatocytes à l'intérieur des tubules séminifères. L'expression est maintenue dans les spermatozoïdes éjaculés. Références associées : PMID:20601678
• Les caractéristiques structurales clés incluent des domaines de type immunoglobuline, une hélice transmembranaire, un domaine kinase intracellulaire et des sites de glycosylation et de formation de ponts disulfure.
• Impliqué dans divers cancers et troubles ; les mutations sont associées au piébaldisme, aux tumeurs stromales gastro-intestinales et à la mastocytose.

Guide expérimental et conseils techniques

• Cet anticorps a été généré contre un peptide synthétique couvrant les acides aminés 871–976 du CD117/c-Kit humain. L'épitope se situe dans la région C-terminale intracellulaire, qui peut être accessible dans des conditions dénaturantes (WB) ou après fixation/perméabilisation appropriée pour l'ICC et l'IHC.
• Pour le Western blot, attendez-vous à un bande d'environ 110 kDa. Utilisez un tampon d'échantillon SDS-PAGE réducteur et validez la détection avec une lignée cellulaire CD117-positive connue (par ex., HMC-1, K562).
• En immunofluorescence (IF/ICC) et immunohistochimie (IHC‑P), une récupération antigénique (par ex., récupération d'épitope induite par la chaleur dans un tampon citrate pH 6.0) et un blocage de l'activité peroxydase endogène peuvent être nécessaires. Optimisez la concentration de l'anticorps primaire et les conditions d'incubation.
• Pour les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme anticorps de capture ou de détection. Il est conseillé de l'associer à un ligand ou à un jeu d'anticorps validé ; confirmez la spécificité avec une protéine CD117 recombinante.

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