Anticorps polyclonal de lapin anti-CCT6B pour WB, IF/ICC, ELISA - Q92526

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CCT6B (sous-unité zêta-2 probable de la protéine 1 du complexe T)

• La CCT6B, également désignée sous les noms Cctz2, CCTZ-2, TSA303, CCT-zeta-2 ou TCP-1-zeta-2, est une sous-unité du complexe T eucaryote contenant la chaperonine (TRiC/CCT), un vaste complexe de chaperon moléculaire en forme de tonneau.
• Elle intervient dans le repliement dépendant de l'ATP des protéines nouvellement synthétisées, principalement l'actine et la tubuline, contribuant ainsi à l'assemblage du cytosquelette et à la régulation du cycle cellulaire.
• En tant que membre de la famille des chaperonines TCP-1, la CCT6B partage une homologie structurale avec les autres sous-unités TRiC, mais se distingue par son profil d'expression spécifique des testicules.
• La localisation subcellulaire est principalement cytoplasmique, où le complexe TRiC facilite le repliement co-traductionnel et post-traductionnel des protéines.
• L'expression spécifique des testicules suggère un rôle spécialisé dans la spermatogenèse, éventuellement dans le repliement de protéines clientes spécifiques des testicules ou au cours des divisions méiotiques.
• La protéine se caractérise par des domaines de liaison à l'ATP et aux nucléotides, ce qui indique un mécanisme de repliement assisté par chaperon ; une liaison aux métaux et une activité hydrolase dépendante du magnésium sont également signalées.
• L'épissage alternatif génère plusieurs variants de transcrits, susceptibles de moduler la composition des sous-unités et la polyvalence fonctionnelle au sein du complexe TRiC.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène comprend les acides aminés 120–340 de la CCT6B humaine, une région pouvant contenir des épitopes conservés ; un alignement des séquences entre espèces doit être effectué afin de prédire la réactivité croisée avec la souris et le rat.
• Pour le Western blot, une bande proche de 58 kDa est attendue ; utiliser des lysats dérivés de testicules ou des lignées cellulaires testiculaires comme contrôles positifs, compte tenu de l'expression spécifique de la CCT6B dans les testicules.
• Pour les applications d'immunofluorescence, les conditions de fixation et de perméabilisation doivent être optimisées pour les antigènes cytoplasmiques ; une co-localisation avec des marqueurs cytoplasmiques connus est recommandée afin de confirmer la spécificité.
• Lors de l'utilisation de l'ELISA, titrer à la fois l'antigène de revêtement (protéine recombinante ou peptide) et l'anticorps primaire afin d'obtenir des rapports signal/bruit optimaux.
• Envisager de valider la spécificité de l'anticorps à l'aide d'échantillons issus d'une invalidation ou d'une inhibition de l'expression de la CCT6B dans le type cellulaire ou le tissu approprié.

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