Anticorps polyclonal anti-CCT4 pour WB, IF/ICC, ELISA - P50991

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CCT4

• CCT4 code pour la sous-unité delta du complexe annulaire de la protéine 1 du complexe T (TCP-1) (TRiC), une chaperonine cytosolique qui médie le repliement ATP-dépendant d'environ 10 % du protéome, notamment l'actine et la tubuline. Références associées : PMID:25467444, PMID:36493755, PMID:35449234
• Le TRiC replie également la protéine 1 du corps de Cajal de la télomérase (WRAP53/TCAB1), liant la fonction de CCT4 au maintien des télomères. Références associées : PMID:25467444
• La chaperonine contribue à la ciliogenèse en assistant l'assemblage du BBSome, un complexe essentiel au trafic vésiculaire vers les cils. Références associées : PMID:20080638
• CCT4 se localise principalement dans le cytoplasme et se concentre au niveau des centrosomes et des corps basaux des cils, ce qui est cohérent avec son rôle dans le repliement des protéines du cytosquelette et le transport ciliaire.
• La protéine fait l'objet de multiples modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation, la méthylation et la phosphorylation, qui peuvent réguler l'activité de la chaperonine.
• L'épissage alternatif produit plusieurs variants de transcrits, suggérant une diversification fonctionnelle.
• En tant que sous-unité du TRiC, CCT4 fait partie d'un grand complexe hétéro-oligomérique composé de huit sous-unités différentes disposées en une structure à double anneau.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 130-390 de la CCT4 humaine ; la liaison aux épitopes au sein de cette région devrait être spécifique, mais une réactivité croisée avec d'autres sous-unités TCP-1 doit être exclue en raison de l'homologie de séquence au sein de la famille.
• Pour le Western blot, une dilution initiale de 1:1000 est suggérée pour les lysats humains, de souris et de rat ; une bande proche de 58 kDa est attendue. Inclure les contrôles positifs et négatifs pertinents.
• En immunofluorescence, CCT4 présente un marquage cytoplasmique avec un enrichissement au niveau des centrosomes et des corps basaux ciliaires ; une pré-extraction avec un détergent peut améliorer le signal des microtubules et des corps basaux.
• Pour les applications ELISA, utiliser la protéine recombinante ou des lysats cellulaires comme antigène de revêtement ; la variabilité d'un lot à l'autre inhérente aux anticorps polyclonaux doit être évaluée pour la cohérence quantitative.
• Compte tenu de la réactivité de l'anticorps chez l'humain, la souris et le rat, il est adapté aux études translationnelles chez ces espèces.

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