Anticorps polyclonal de lapin anti-CCK pour WB et ELISA - P06307

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la cholécystokinine

• La cholécystokinine (CCK) est une hormone peptidique qui joue un rôle clé dans la physiologie gastro-intestinale en induisant la contraction de la vésicule biliaire et la sécrétion d'enzymes pancréatiques.
• La CCK transmet son signal par l'intermédiaire de deux sous-types de récepteurs : les récepteurs CCK-A (principalement dans le pancréas) stimulent la libération d'amylase, tandis que les récepteurs CCK-B (principalement dans l'estomac) médient la sécrétion d'acide gastrique.
• La protéine est synthétisée sous forme de précurseur et subit un traitement protéolytique au niveau de résidus basiques appariés pour produire l'hormone biologiquement active.
• La CCK est une protéine sécrétée présente dans le liquide céphalo-rachidien et l'urine, sa fonction dans le cerveau est toujours à l'étude.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la sulfatation des résidus tyrosine, l'amidation C-terminale et la glycosylation, qui sont essentielles à son activité biologique.
• Le poids moléculaire prédit du peptide mature est d'environ 12,7 kDa (UniProt), et l'anticorps détecte une bande autour de 13 kDa en conditions expérimentales.
• La CCK fait partie du protéome de référence et sa structure 3D a été résolue, ce qui facilite sa caractérisation structurale.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 21 à 115 du précurseur complet de la CCK, couvrant la majorité de l'hormone mature ; cette conception permet de détecter à la fois le précurseur et les formes traitées.
• Pour le Western blot, notez le faible poids moléculaire (~13 kDa) et optimisez la concentration du gel (par exemple, SDS-PAGE à 15%) et les conditions de transfert (par exemple, membrane avec seuil de coupure pour bas poids moléculaire, taille de pore de 0,2 µm) pour retenir le peptide.
• Dans les applications ELISA, l'anticorps polyclonal peut offrir une liaison multi-épitopes, améliorant potentiellement la sensibilité ; cependant, incluez toujours des contrôles positifs et négatifs appropriés.
• Étant donné que la CCK est un peptide sécrété, la préparation d'échantillons à partir de tissus ou de lysats cellulaires peut nécessiter une manipulation prudente pour éviter la dégradation ; envisagez d'utiliser des inhibiteurs de protéases et du matériel réfrigéré.
• La réactivité croisée rapportée avec la souris et le rat suggère une utilité dans les modèles de rongeurs, mais une validation spécifique à l'espèce dans vos propres essais est recommandée.

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