Anticorps monoclonal lapin Anti-CBFB pour WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q13951

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CBFB

• Encodée par le gène CBFB, la sous-unité bêta du facteur de liaison au noyau est une sous-unité de facteur de transcription qui forme un complexe hétérodimère avec les protéines de la famille RUNX (RUNX1, RUNX2, RUNX3), appelé facteur de liaison au noyau (CBF). CBFB augmente allostériquement l'affinité de liaison à l'ADN des facteurs de transcription RUNX.
• Les complexes CBF se lient à la séquence consensus centrale 5′-TGTGGT-3′ au niveau des enhanceurs et des promoteurs de nombreux gènes, dont le virus de la leucémie murine, l'enhancer du polyomavirus, les enhanceurs du récepteur des cellules T, LCK, IL3 et GM-CSF, régulant ainsi la transcription.
• Au cours du développement des lymphocytes T cytotoxiques (CD8+), les complexes CBF agissent comme des silencieux transcriptionnels en se liant à la séquence de fixation RUNX au niveau du locus ZBTB7B, réprimant son expression pour permettre la différenciation.
• CBFB est ciblée par la protéine Vif du VIH-1, qui la recrute pour former un complexe ubiquitine-protéine ligase E3 Cullin-5-RING (complexe ECS) qui catalyse l'ubiquitination et la dégradation d'APOBEC3F et APOBEC3G (PubMed:22190037, PubMed:31792451, PubMed:36598981). Le complexe peut également ubiquitiner APOBEC3H dans une certaine mesure (PubMed:37640699). L'association avec Vif inhibe également l'activité coactivatrice de CBFB (PubMed:22190037). Références associées : PMID:22190037 PMID:31792451 PMID:36598981 PMID:37640699
• La localisation subcellulaire est majoritairement nucléaire, ce qui est cohérent avec son rôle dans la régulation transcriptionnelle.
• Les mots-clés d'UniProt soulignent son implication dans l'épissage alternatif, les réarrangements chromosomiques (par exemple inv(16) dans la leucémie myéloïde aiguë), son potentiel proto-oncogène et ses associations pathologiques, notamment le nanisme. C'est également une phosphoprotéine.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé est une protéine de fusion recombinante couvrant les acides aminés 1-182 de la CBFB humaine. Cette portion N-terminale contient le domaine conservé nécessaire à l'interaction avec RUNX et est identique ou très similaire chez la souris et le rat, ce qui explique la réactivité croisée observée.
• Pour le western blot (WB), une bande d'environ 22 kDa est attendue. Il est recommandé d'utiliser des extraits nucléaires et des témoins de chargement appropriés.
• L'immunofluorescence (IF/ICC) et l'immunohistochimie (IHC-P) devraient révéler une localisation nucléaire. Réalisez une validation sur des lignées cellulaires ou des tissus connus pour exprimer CBFB.
• L'ELISA peut être utilisée pour l'analyse quantitative ; les conditions de revêtement et les concentrations d'anticorps optimales doivent être déterminées expérimentalement.
• Comme pour tout anticorps, réalisez une validation dans votre contexte expérimental spécifique et envisagez des contrôles de pré-adsorption si nécessaire.

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