Anticorps monoclonal de lapin anti-M6PR indépendant des cations (IGF2R) pour WB, IHC-P, ELISA - P11717

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du M6PR indépendant des cations (IGF2R)

• Le M6PR indépendant des cations (IGF2R), également désigné récepteur de 300 kDa au mannose-6-phosphate (MPR300) ou récepteur de l'insulin-like growth factor 2, est une grande glycoprotéine transmembranaire codée par le gène IGF2R.
• Il médie le transport des enzymes lysosomales phosphorylées depuis l'appareil de Golgi et la surface cellulaire vers les lysosomes. Les enzymes lysosomales portant des résidus phosphomannosyl se lient spécifiquement au récepteur, et le complexe récepteur-ligand est internalisé, se dissociant dans le compartiment pré-lysosomal acide. Le récepteur est ensuite recyclé vers l'appareil de Golgi via le complexe rétromère. Références associées : PMID:18817523, PMID:2963003
• En plus de son rôle de trafic dépendant du M6P, l'IGF2R se lie avec une haute affinité à l'insulin-like growth factor 2 (IGF2), fonctionnant comme un récepteur de clairance qui régule les niveaux extracellulaires d'IGF2. Références associées : PMID:18046459
• L'IGF2R agit comme un régulateur positif de la coactivation des lymphocytes T en se liant à la dipeptidyl peptidase 4 (DPP4). Références associées : PMID:10900005
• Le récepteur circule dynamiquement entre la membrane de l'appareil de Golgi et les compartiments endosomaux, une localisation essentielle à ses fonctions de tri et de transport.
• L'IGF2R est largement modifié de façon post-traductionnelle, présentant des glycosylations, des ponts disulfure, des acétylations, des méthylations, des palmitoylations et des phosphorylations. Sa structure comprend un peptide signal, 15 répétitions extracellulaires, une seule hélice transmembranaire et une courte queue cytoplasmique.
• La protéine mature a un poids moléculaire prédit d'environ 274 kDa, ce qui correspond à sa désignation MPR300.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond à une région C-terminale (aa 2140-2300), ce qui peut favoriser la détection de l'IGF2R de pleine longueur. Envisagez d'utiliser des lysats de tissus riches en lysosomes ou de lignées cellulaires (par exemple foie, placenta ou fibroblastes) comme contrôles positifs pour le Western blot.
• En raison de la grande taille de la protéine (274 kDa), utilisez un gel de polyacrylamide à faible pourcentage (6–8 %) et des conditions de transfert humide prolongées (par exemple, toute la nuit à 4°C) sur membrane PVDF. Incluez des marqueurs de poids moléculaire élevé pré-colorés pour surveiller l'efficacité du transfert.
• Pour l'IHC-P, effectuez une récupération antigénique appropriée et optimisez la dilution de l'anticorps primaire. Incluez des contrôles tissulaires positifs et négatifs pour valider la spécificité de la coloration dans les échantillons humains et de rat.
• Les applications ELISA peuvent bénéficier de l'utilisation de standards protéiques recombinants pour établir des dosages quantitatifs. Si les conceptions expérimentales impliquent des modèles rongeurs, validez la réactivité croisée dans les systèmes de rat.
• Validez toujours l'anticorps dans votre contexte expérimental spécifique, car les performances peuvent varier selon la préparation des échantillons et les conditions de test.

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