Anticorps polyclonal anti-M6PR indépendant des cations (IGF2R) pour WB, IF/ICC, ELISA - P11717

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du M6PR indépendant des cations (IGF2R)

• Le récepteur mannose-6-phosphate indépendant des cations (CI-M6PR), également connu sous le nom de récepteur du facteur de croissance analogue à l'insuline 2 (IGF2R), CD222 ou MPR300, est codé par le gène IGF2R chez l'homme. C'est un grand récepteur transmembranaire multifonctionnel qui joue un rôle essentiel dans le trafic des enzymes lysosomales et l'élimination des facteurs de croissance.
• Il médie le transport des enzymes lysosomales phosphorylées nouvellement synthétisées depuis l'appareil de Golgi vers les lysosomes. Il se lie aux résidus phosphomannosyles de ces enzymes, et le complexe récepteur-ligand est acheminé vers un compartiment prélysosomal acide où la dissociation se produit. Le récepteur est ensuite recyclé vers le Golgi via le complexe rétromère. Références associées : PMID:18817523 PMID:2963003
• Il se lie au facteur de croissance analogue à l'insuline 2 (IGF2) avec une haute affinité, conduisant à l'internalisation et à la dégradation lysosomale de l'IGF2. Cette fonction régule négativement la signalisation IGF et limite la croissance fœtale. La perte d'empreinte ou des mutations du gène IGF2R ont été associées à des cancers et à des troubles du développement. Références associées : PMID:18046459
• Il agit comme régulateur positif de la coactivation des lymphocytes T en se liant à la dipeptidyl peptidase 4 (DPP4/CD26) à la surface cellulaire, établissant un lien entre les fonctions métaboliques et immunitaires. Références associées : PMID:10900005
• Il se localise principalement sur la membrane de l'appareil de Golgi et des endosomes, où il cycle entre le réseau trans-Golgi, les endosomes et la membrane plasmique pour capturer les cargaisons intracellulaires et à la surface cellulaire.
• Il subit plusieurs modifications post-traductionnelles : acétylation, phosphorylation, palmitoylation et méthylation. Il contient des ponts disulfures, est fortement glycosylé et est ancré aux membranes par une seule hélice transmembranaire. Ces caractéristiques sont essentielles pour sa stabilité, son trafic et ses fonctions de liaison aux ligands.
• La protéine mature a un poids moléculaire apparent d'environ 274 kDa, ce qui correspond à la masse prédite à partir de sa séquence d'acides aminés. Son grand domaine extracellulaire est composé de 15 unités répétées, qui sont impliquées dans la liaison au mannose-6-phosphate et à l'IGF2.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène utilisé était une protéine de fusion recombinante couvrant les acides aminés 2327 à 2491, qui se situe dans la région C-terminale du récepteur. Cette conception peut favoriser la reconnaissance de la CI-M6PR (IGF2R) pleine longueur dans sa conformation native.
• Compte tenu du poids moléculaire élevé (~274 kDa), envisagez d'utiliser des gels SDS-PAGE à faible pourcentage (par exemple, gel de séparation à 6 %) et des temps de transfert prolongés ou des méthodes de transfert par immersion pour garantir un transfert efficace de la protéine cible.
• Cet anticorps est un polyclonal de lapin ; il peut détecter des bandes supplémentaires du fait de la reconnaissance de plusieurs épitopes. Validez la spécificité en comparant les intensités de signal entre les lysats témoins et les lysats avec knock-down/knock-out d'IGF2R.
• Pour l'immunofluorescence, confirmez que le profil de coloration chevauche les marqueurs établis du Golgi/des endosomes. Les conditions de perméabilisation doivent être optimisées car l'épitope est intracellulaire.
• Pour les applications ELISA, utilisez l'immunogène recombinant comme contrôle positif pour évaluer l'activité de liaison. Ne déduisez pas de limites de détection quantitatives uniquement à partir des spécifications du produit ; un titrage empirique est recommandé.

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