Anticorps polyclonal anti-cathepsine L/V/K/H pour WB, IF/ICC, ELISA - P07711

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la cathepsine L

• La procathepsine L (cathepsine L1) est une cystéine protéase lysosomiale codée par le gène CTSL, également connue sous le nom de protéine excrétée majeure (MEP). Une initiation alternative de la traduction produit des isoformes avec ou sans peptide signal, ce qui entraîne une localisation nucléaire ou lysosomiale.
• Elle agit comme une thiol protéase essentielle pour la dégradation globale des protéines dans les lysosomes, le traitement des antigènes, le remodelage osseux et la libération d'hormones thyroïdiennes par protéolyse de la thyroglobuline.
• Extracellulairement, elle agit comme une enzyme majeure de dégradation de l'élastine à pH neutre et génère de l'endostatine à partir de COL18A1, contribuant au remodelage de la matrice extracellulaire pendant l'inflammation. Références associées : PMID:10716919
• Elle facilite l'entrée des coronavirus (SARS-CoV, SARS-CoV-2) et du virus Ebola dans les cellules hôtes en activant protéolytiquement les glycoprotéines d'enveloppe virales dans les lysosomes par une voie lente activée par l'acide. Références associées : PMID:16339146 PMID:18562523 PMID:32142651 PMID:16081529 PMID:26953343
• Elle régule la progression du cycle cellulaire par le traitement protéolytique du facteur de transcription CUX1 ; les isoformes nucléaires dépourvues de peptide signal clivent CUX1 pour moduler l'expression génique. Références associées : PMID:15099520
• La localisation subcellulaire inclut les lysosomes, les membranes cellulaires apicales, les vésicules de sécrétion (granules chromaffines) et l'espace extracellulaire ; elle est également présente dans le noyau lorsqu'elle est traduite à partir de sites d'initiation en aval.
• Elle est modifiée post-traductionnellement par glycosylation et formation de ponts disulfures ; elle est synthétisée sous forme de zymogène inactif qui est traité protéolytiquement pour donner l'enzyme active mature.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé correspond aux acides aminés 114-333 de la cathepsine L humaine, une région du domaine protéase mature, ce qui peut contribuer à la réactivité croisée avec les orthologues de souris et de rat.
• Pour le Western blotting (WB), le poids moléculaire prédit de la proforme est d'environ 38 kDa ; cependant, les formes maturées traitées peuvent apparaître plus petites. Ajoutez des inhibiteurs de protéases appropriés lors de la préparation des échantillons.
• En immunofluorescence (IF/ICC), tenez compte des conditions de perméabilisation pour détecter les pools lysosomiaux ou nucléaires, et validez la localisation avec des marqueurs d'organites.
• Les applications ELISA peuvent nécessiter l'optimisation des conditions de revêtement et de la dilution de l'anticorps ; utilisez des standards de protéine recombinante ou de peptide comme contrôles positifs.
• En raison de l'initiation alternative, plusieurs isoformes peuvent être présentes ; vérifiez les profils de bandes dans votre système cellulaire ou tissulaire avec des contrôles appropriés.

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