Anticorps monoclonal anti-cathépsine L pour WB, IHC-P, ELISA - P07711

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la cathépsine L

• La procathépsine L (cathépsine L1/MEP) est une protéase thiol lysosomale qui joue un rôle central dans la dégradation des protéines, le traitement des antigènes et le remodelage osseux (probable).
• L’initiation alternative de la traduction produit des isoformes nucléaires qui clivent le facteur de transcription CUX1, régulant ainsi la progression du cycle cellulaire. Références associées : PMID:15099520
• Dans la thyroïde, elle solubilise la thyroglobuline afin de permettre la libération de l’hormone T4 ; dans les cellules neuroendocrines, elle transforme la proenképhaline en enképhaline.
• La cathépsine L sécrétée génère de l’endostatine à partir du collagène XVIII et, en tant qu’élastase, elle dégrade la matrice extracellulaire lors de l’inflammation. Références associées : PMID:10716919
• Elle facilite l’entrée du SARS-CoV, du SARS-CoV-2 et d’autres virus en activant protéolytiquement les glycoprotéines de spicule dans les lysosomes. Références associées : PMID:32142651, PMID:16339146, PMID:18562523
• Au niveau subcellulaire, elle se trouve dans les lysosomes, les vésicules sécrétoires, la membrane cellulaire apicale, l’espace extracellulaire et le noyau ; elle est active sous forme d’enzyme mature après élimination protéolytique du propeptide.
• Elle appartient à la famille de la papaïne (C1) des protéases à cystéine ; il s’agit d’une glycoprotéine contenant des ponts disulfure, synthétisée sous forme de zymogène et activée par un pH faible ou par d’autres protéases.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène (aa 100–200) se situe dans la région N-terminale de la procathépsine L humaine ; l’épitope peut être exposé à la fois dans la proenzyme et dans l’enzyme mature, mais les utilisateurs doivent confirmer la spécificité pour la forme souhaitée.
• Pour le Western blot, la bande principale devrait se situer à environ 38 kDa (procathépsine L) ; dans des conditions réductrices, la chaîne lourde mature (environ 25 kDa) peut également être détectée. Optimisez les conditions de chargement et de lyse afin de minimiser l’autolyse.
• En IHC-P, utilisez une récupération antigénique induite par la chaleur (par exemple, un tampon citrate à pH 6,0) et validez avec des tissus positifs connus pour exprimer la cathépsine L (par exemple, le foie et le placenta). Incluez un contrôle d’isotype.
• Pour l’ELISA, envisagez de l’associer à un autre anticorps monoclonal ou polyclonal dirigé contre la cible afin de construire un dosage en sandwich, et validez la linéarité ainsi que la récupération dans votre matrice.

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