Anticorps polyclonal Anti-Cathépsine K (CTSK) pour WB et ELISA - P43235

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Cathépsine K

• La Cathépsine K (CTSK), également connue sous le nom de cathépsine O, O2 ou X, est une cystéine protéase lysosomale de la famille de la papaïne, synthétisée sous forme de zymogène inactif qui subit une activation protéolytique.
• Elle joue un rôle critique dans la résorption osseuse ostéoclastique en dégradant les protéines de la matrice osseuse, notamment le collagène de type I, et est essentielle au remodelage osseux normal.
• Le CTSK présente une puissante activité endoprotéasique contre le fibrinogène à pH acide, suggérant un rôle dans la dégradation de la matrice extracellulaire au-delà de l'os.
• Dans la thyroïde, le CTSK est impliqué dans la libération de l'hormone thyroïdienne thyroxine (T4) par protéolyse limitée de la thyroglobuline dans la lumière du follicule thyroïdien (PubMed:11082042). Références connexes : PMID:11082042
• La protéine est principalement exprimée dans les ostéoclastes (PubMed:7805878) et les cellules épithéliales thyroïdiennes (PubMed:11082042). Références connexes : PMID:7805878, PMID:11082042
• Au niveau subcellulaire, le CTSK se localise dans les lysosomes, est sécrété dans l'espace extracellulaire et peut s'associer à la membrane cellulaire apicale dans les cellules polarisées.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation et la formation de ponts disulfures, qui sont importantes pour la stabilité et l'activité ; l'enzyme mature est une glycoprotéine.
• Les mutations du CTSK sont associées à la pycnodysostose, une dysplasie squelettique autosomique récessive caractérisée par des os denses (ostéosclérose).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Puisque l'immunogène a été généré contre un fragment recombinant (aa 115-329) englobant le domaine catalytique mature, l'anticorps est censé reconnaître à la forme pro et la forme mature active du CTSK dans des conditions de Western blot (WB) dénaturant ; cependant, la détection de la protéine endogène peut nécessiter une optimisation en fonction des niveaux d'expression tissulaire.
• Pour l'analyse par Western blot, envisagez d'utiliser des conditions réductrices et d'inclure des inhibiteurs de protéases lors de la préparation des échantillons pour empêcher la dégradation du CTSK. Le poids moléculaire prédit de la pro-enzyme est d'environ 37 kDa, mais les formes clivées matures peuvent apparaître plus petites.
• La réactivité croisée rapportée avec la souris suggère une utilité pour les études translationnelles utilisant des modèles murins du métabolisme osseux. Validez la réactivité croisée dans votre système expérimental spécifique.
• Pour ELISA, envisagez d'apparier cet anticorps avec un anticorps de capture ou de le conjuguer directement pour la détection ; notez qu'en tant que polyclonal, la cohérence d'un lot à l'autre doit être vérifiée.
• Des conditions de tampon acide peuvent améliorer l'interaction anticorps-antigène pour des applications telles que l'immunohistochimie ou les tests d'activité enzymatique, compte tenu de l'optimum de pH acide du CTSK.

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