Anticorps polyclonal Anti-Caspase-9 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P55211

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Caspase-9

• La Caspase-9, également connue sous le nom de protéase apoptotique Mch-6 (MCH6), APAF-3, ou ICE-LAP6, est un membre de la famille des protéases à cystéine-aspartique (caspases) et est codée par le gène CASP9 chez l'humain.
• Elle fonctionne comme une caspase initiatrice dans la voie apoptotique intrinsèque. Suite à la libération du cytochrome c et à la formation de l'apoptosome Apaf-1, la caspase-9 est recrutée et activée, clivant et activant ensuite les caspases effectrices -3 et -7. Elle clive également la poly(ADP-ribose) polymérase (PARP) et favorise l'apoptose induite par les dommages à l'ADN de manière dépendante d'ABL1. De plus, la caspase-9 clive protéolytiquement BIRC6 suite à l'inhibition médiée par DIABLO/SMAC du complexe BIRC6-caspase. Références associées : PMID:36758105 PMID:36758106
• L'épissage alternatif de CASP9 produit un isoforme catalytiquement inactif qui agit comme un inhibiteur dominant-négatif de la signalisation de la caspase-9.
• La Caspase-9 est exprimée de manière ubiquitaire, avec les niveaux les plus élevés dans le cœur où elle est spécifiquement trouvée dans les myocytes. Une expression modérée est observée dans le foie, le muscle squelettique et le pancréas.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation et la conjugaison de type ubiquitine, comme indiqué par les données de protéomique, qui régulent son activité, sa stabilité et son interaction avec d'autres protéines.
• La protéine est synthétisée sous forme de zymogène inactif nécessitant un traitement protéolytique pour son activation. En tant que thiol protéase, elle utilise un résidu cystéine catalytique pour l'hydrolyse, et elle est classée parmi les hydrolases liées à l'apoptose.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène utilisé pour cet anticorps correspond aux acides aminés 139–416 de la caspase-9 humaine (NP_001220.2). Cette région couvre une partie du grand domaine catalytique, reconnaissant potentiellement à la fois les formes pleine longueur et clivées. Pour le Western blot, une bande d'environ 46 kDa peut être détectée pour la proforme, avec des bandes supplémentaires correspondant aux fragments clivés selon le traitement de l'échantillon.
• L'anticorps est recommandé pour le Western blot (WB), l'immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), l'immunohistochimie (IHC-P) et l'ELISA. Les chercheurs doivent optimiser les dilutions et inclure des témoins positifs et négatifs appropriés, en particulier lorsqu'ils travaillent sur des échantillons humains, murins et de rat.
• Étant donné que la caspase-9 est principalement une protéine cytoplasmique qui se transloque vers les mitochondries pendant l'apoptose, la localisation subcellulaire peut varier, et les conditions de fixation/permeabilisation pour l'IF/ICC ou l'IHC-P doivent être adaptées en conséquence.

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