Anticorps polyclonal anti-Caspase-9 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P55211

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Caspase-9

• La Caspase-9 est une cystéine protéase de la famille des caspases qui agit comme caspase initiatrice dans la voie apoptotique intrinsèque.
• Lors de sa liaison à l'Apaf-1, la caspase-9 s'active puis clive et active les caspases effectrices, comme la caspase-3 et la caspase-7, pour mettre en œuvre l'apoptose.
• La Caspase-9 promeut l'apoptose induite par des dommages à l'ADN d'une manière dépendante d'ABL1/c-Abl et clive protéolytiquement la poly(ADP-ribose) polymérase (PARP).
• La Caspase-9 clive BIRC6 après l'inhibition de la liaison BIRC6-caspase par DIABLO/SMAC. Références associées : PMID:36758105, PMID:36758106
• Une isoforme épissée alternativement, la Caspase-9S, dépourvue d'activité catalytique, agit comme un inhibiteur dominant-négatif de l'enzyme pleine longueur.
• Elle est exprimée de manière ubiquitaire avec les niveaux les plus élevés dans le cœur (spécifiquement dans les myocytes), modérés dans le foie, le muscle squelettique et le pancréas, et faibles dans les autres tissus.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation et la conjugaison à l'ubiquitine, qui régulent son activité ; elle est synthétisée sous forme de zymogène nécessitant un clivage protéolytique pour être activée.
• Mots-clés : Apoptose, Hydrolase, Protéase, Protéase à thiol, Phosphoprotéine, Conjugaison Ubl, Zymogène, Épissage alternatif, Structure 3D.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 139-416 de la caspase-9 humaine, qui inclut la grande sous-unité ; l'anticorps peut détecter à la fois la proforme pleine longueur (~46 kDa) et les formes clivées. Prévoyez des marqueurs de poids moléculaire adaptés.
• Pour le Western blot, utilisez des lysats de tissu cardiaque ou hépatique comme contrôles positifs, compte tenu de l'expression relativement élevée de la caspase-9 dans ces tissus.
• En immunohistochimie, validez la coloration sur coupes de cœur ou de foie et optimisez les conditions de récupération antigénique pour les tissus fixés au formol et inclus en paraffine.
• En immunofluorescence, la caspase-9 se localise principalement dans le cytoplasme ; prévoyez une co-coloration avec des marqueurs mitochondriaux pour évaluer l'activation apoptotique.

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