Anticorps polyclonal de lapin anti-Caspase-8 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14790

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Caspase-8

• Le gène CASP8 code pour une thiol protéase qui agit comme interrupteur moléculaire de l'apoptose, de la nécroptose et de la pyroptose, et est essentiel pour prévenir les lésions tissulaires au cours du développement embryonnaire et à l'âge adulte. Références associées : PMID:23516580, PMID:35338844, PMID:35446120
• Dans l'apoptose extrinsèque, CASP8 est recrutée sur les récepteurs de mort (FAS/TNFRSF1A) par l'adaptateur FADD, formant le complexe de signalisation inducteur de mort (DISC) où elle subit une activation protéolytique. Références associées : PMID:8681376, PMID:8681377, PMID:9184224
• La CASP8 activée clive et active les caspases effectrices en aval (CASP3, CASP4, CASP6, CASP7, CASP9, CASP10) ainsi que BID, reliant la signalisation des récepteurs de mort à la voie mitochondriale de l'apoptose. Références associées : PMID:16916640, PMID:8962078, PMID:9006941
• CASP8 agit également comme régulateur négatif de la nécroptose en clivant RIPK1 au niveau de l'Asp-324, limitant la nécroptose induite par le TNF et l'inflammation. Références associées : PMID:31827280, PMID:31827281
• Dans la pyroptose, CASP8 clive les gasdermines C et D (GSDMC, GSDMD), générant des fragments N-terminaux formant des pores qui déclenchent la perméabilisation membranaire. Références associées : PMID:32929201, PMID:34012073
• Subcellulairement, CASP8 se localise dans le cytoplasme, le noyau et les projections cellulaires comme les lamellipodes.
• Les isoformes 1, 5 et 7 sont largement exprimées, avec les niveaux les plus élevés dans les leucocytes sanguins périphériques, la rate, le thymus et le foie ; les isoformes épissées alternatives dépourvues d'activité catalytique peuvent agir comme inhibiteurs dominants négatifs de la cascade des caspases. Références associées : PMID:12010809

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à la région C-terminale (aa 376–479) de la Caspase-8 humaine ; la forme pleine longueur et les fragments clivés peuvent tous deux être détectés en Western blot — validez le profil des bandes dans votre système expérimental.
• Pour le Western blot, attendez une bande autour de 55 kDa pour la proenzyme ; des bandes supplémentaires correspondant aux fragments clivés actifs peuvent apparaître après induction de l'apoptose.
• En immunohistochimie (IHC-P), envisagez un démasquage antigénique avec un tampon citrate ou Tris-EDTA et optimisez les conditions de blocage pour votre tissu.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), ajustez la fixation et la perméabilisation pour équilibrer accessibilité de l'antigène et préservation morphologique.
• La réactivité croisée de cet anticorps avec la souris et le rat est prédite d'après les données du fabricant ; réalisez un alignement de séquence pour confirmer la conservation de l'épitope si vous travaillez avec d'autres espèces.

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