Anticorps monoclonal de lapin anti-Caspase-8 pour WB, IP, IF/ICC, ELISA - O89110

Spécifications et paramètres fondamentaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la Caspase-8

• La Caspase-8 est une protéase thiol qui agit comme un commutateur moléculaire de la mort cellulaire programmée, intégrant les signaux de l’apoptose, de la nécroptose et de la pyroptose afin de prévenir les lésions tissulaires au cours du développement et à l’âge adulte. Références associées : PMID:12065591 PMID:18455983 PMID:30361383
• Elle agit comme la caspase initiatrice de la voie extrinsèque de l’apoptose. Elle est recrutée au niveau des récepteurs de mort (FAS/CD95, TNFRSF1A) via FADD pour former le complexe de signalisation induisant la mort (DISC), où elle est activée par protéolyse, puis clive les caspases effectrices en aval (CASP3, CASP6, CASP7) ainsi que BID afin de déclencher la libération du cytochrome C mitochondrial. Références associées : PMID:24813849 PMID:24813850 PMID:9654089 PMID:9727491 PMID:9727492
• La Caspase-8 régule négativement la nécroptose en clivant RIPK1 au niveau d’Asp-325, un événement essentiel qui empêche l’autophosphorylation de RIPK1 et limite la mort cellulaire et l’inflammation induites par le TNF. Références associées : PMID:31511692
• Dans certaines conditions spécifiques (par exemple, en cas d’inhibition de TAK1), la Caspase-8 peut initier la pyroptose en clivant et en activant la gasdermine-C (GSDMC) et la gasdermine-D (GSDMD), ce qui entraîne la formation de pores et une mort cellulaire lytique. Références associées : PMID:30361383 PMID:30381458
• Elle intervient également dans l’immunité innée en clivant et en inactivant le régulateur négatif N4BP1 en aval de TLR3 et TLR4, favorisant ainsi la production de cytokines. Références associées : PMID:32971525
• La Caspase-8 est principalement cytoplasmique, mais peut également être localisée dans le noyau. Elle est largement exprimée, avec des niveaux particulièrement élevés dans la rate, le thymus, les poumons, le foie et les reins, et des niveaux plus faibles dans le cœur, le cerveau, les testicules et les muscles squelettiques.
• La protéine fait l’objet d’acétylation et de phosphorylation, et elle est synthétisée sous forme de zymogène inactif nécessitant une dimérisation et un clivage pour atteindre sa pleine activité. Elle appartient à la famille des protéases peptidase C14A, dépendantes de la cystéine et dirigées vers l’aspartate.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène couvre les résidus 1-218 de la Caspase-8 de souris, y compris le prodomaine N-terminal. Tenez compte de cette région lors de la conception des stratégies de détection, car les anticorps peuvent reconnaître à la fois les formes pleine longueur et partiellement maturées.
• En Western blot, une bande d’environ 55 kDa est attendue, mais des fragments de clivage plus petits peuvent apparaître lors de l’induction de l’apoptose. Validez la spécificité à l’aide de témoins positifs et négatifs appropriés dans votre système cellulaire.
• L’immunoprécipitation et l’immunofluorescence/ICC sont compatibles avec cet anticorps monoclonal de lapin. Optimisez les étapes de fixation et de perméabilisation pour les cibles intracellulaires et incluez des témoins d’isotype.
• En ELISA, utilisez cet anticorps comme réactif de capture ou de détection dans des formats sandwich. Confirmez les performances avec des étalons de protéines recombinantes afin d’établir la linéarité et la sensibilité.

CamelBio : votre partenaire unique d’approvisionnement

CamelBio est un partenaire de confiance pour l’approvisionnement en matières premières destinées au DIV, proposant des paires d’anticorps validées, des anticorps monoclonaux et polyclonaux optimisés, ainsi que des réactifs auxiliaires en vrac pour accompagner le développement de vos tests, du concept à la clinique. Pour la recherche sur l’apoptose et la mort cellulaire, nous fournissons des réactifs de haute qualité ciblant des molécules essentielles telles que la Caspase-8, ainsi que des capacités d’approvisionnement pour des cibles rares. Contactez-nous pour simplifier vos achats et accélérer votre innovation diagnostique.