Anticorps polyclonal anti-Caspase-1 pour WB, IF-P, ELISA - P29466

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la Caspase-1

• La Caspase-1, également connue sous le nom de convertase de l’interleukine-1 bêta (ICE) ou p45, est une protéase thiol et un membre clé de la famille des protéases à cystéine et à acide aspartique (caspases).
• Lorsqu’elle est activée au sein du complexe de l’inflammasome, elle clive protéolytiquement la pro-IL-1β et la pro-IL-18 en leurs formes matures actives, déclenchant des réponses pro-inflammatoires. Références associées : PMID:15326478 PMID:15498465 PMID:1574116
• Elle clive la gasdermine-D (GSDMD) afin de déclencher la mort cellulaire pyroptotique, la reconnaissance du substrat dépendant d’une interface d’exosite plutôt que d’un site de clivage consensuel strict. Références associées : PMID:26375003 PMID:32051255 PMID:32109412 PMID:32553275
• Ses substrats supplémentaires comprennent CASP7, qui est clivée afin de favoriser la réparation de la membrane plasmique lors d’une infection bactérienne ; CGAS, qui est inactivée lors d’une infection par un virus à ADN ; et SPHK2, qui est libérée dans les cellules apoptotiques. Références associées : PMID:22464733 PMID:28314590 PMID:20197547
• Elle est principalement localisée dans le cytoplasme et s’associe à la membrane cellulaire.
• La Caspase-1 est fortement exprimée dans la rate et les poumons, avec des niveaux plus faibles dans le foie, le cœur, l’intestin grêle, le côlon, le thymus, la prostate, les muscles squelettiques, les leucocytes du sang périphérique, les reins et les testicules ; elle est absente du cerveau.
• La protéine subit une maturation autoprotéolytique à partir d’un zymogène de 45 kDa et est soumise à une phosphorylation, à la formation de liaisons isopeptidiques et à une conjugaison de type ubiquitine. L’épissage alternatif génère plusieurs isoformes.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L’immunogène correspond à une région située dans la sous-unité p20 de la pro-Caspase-1 humaine, ce qui suggère que l’anticorps peut reconnaître à la fois la proenzyme complète de 45 kDa et ses fragments traités. En Western blot, envisagez d’analyser des lysats de cellules traitées avec des activateurs de l’inflammasome (par exemple, LPS/ATP) afin d’observer l’activation de la Caspase-1.
• Pour l’immunofluorescence (IF-P), validez l’anticorps dans des lignées cellulaires ou des tissus présentant une expression connue de CASP1 (par exemple, les macrophages THP-1 et la rate), et optimisez la perméabilisation afin de détecter les pools cytoplasmiques et associés à la membrane.
• En ELISA, utilisez l’anticorps comme réactif de capture ou de détection pour quantifier la Caspase-1 ; confirmez la réactivité contre la CASP1 humaine recombinante ainsi que la réactivité croisée avec les homologues murins et de rat dans la matrice d’échantillon concernée.

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