Anticorps polyclonal de lapin anti-CASK pour WB, IF/ICC, ELISA - O14936

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CASK

• CASK est une protéine périphérique de la membrane plasmique appartenant à la famille des guanylate kinases associées à la membrane (MAGUK), également appelée serine protéine kinase dépendante du calcium/calmoduline ou homologue de la protéine lin-2.
• Il agit comme une kinase sérine/thréonine indépendante du Mg²⁺ à structure d'échafaudage multidomaine qui phosphoryle des substrats tels que NRXN1, contribuant à l'ancrage des protéines transmembranaires synaptiques et au trafic des canaux ioniques. Références associées : PMID:18423203
• Il joue un rôle dans le développement neural et la régulation de l'expression génique via son interaction avec le facteur de transcription TBR1, et s'associe au complexe LIN-10-LIN-2-LIN-7 pour transporter la sous-unité NR2B du récepteur NMDA via KIF17 le long des microtubules.
• Il se lie à diverses protéines de surface cellulaire, notamment la protéine précurseur de l'amyloïde, les néurexines et les syndécanes, et peut médier un lien entre la matrice extracellulaire et le cytosquelette d'actine via son interaction avec le syndécan et la protéine 4.1 liant la spectrine.
• Il se localise dans le noyau, le cytoplasme et la membrane cellulaire, ce qui reflète ses rôles polyvalents d'échafaudage et de signalisation.
• Il est exprimé de manière ubiquitaire, avec des niveaux significativement plus élevés dans le cerveau comparativement au rein, au poumon et au foie, et dans le cerveau et le rein fœtaux par rapport au poumon et au foie fœtaux.
• Il contient un domaine SH3, plusieurs modules d'interaction protéine-protéine, est soumis à l'épissage alternatif ; il est phosphorylé sur plusieurs résidus, comme l'ont identifié des approches protéomiques.
• Les variants génétiques de CASK sont associés à des déficiences intellectuelles et des troubles neurologiques, ce qui souligne son rôle critique dans le développement neural.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène correspond à la région N-terminale (aa 1–300) de la CASK humaine ; cet anticorps peut être utilisé pour détecter la CASK pleine longueur et potentiellement certaines isoformes, mais il faut être conscient du masquage potentiel des épitopes dans les échantillons fixés.
• Pour le Western blot, attendez une bande autour de 105 kDa ; nous recommandons d'inclure des lysats positifs et négatifs appropriés pour confirmer la spécificité, ainsi que de vérifier la cohérence d'un lot à l'autre pour les comparaisons quantitatives.
• En immunofluorescence/ICC, la localisation de CASK peut apparaître nucléaire, cytoplasmique et associée à la membrane ; les conditions optimales de fixation et de perméabilisation doivent être déterminées empiriquement pour le type cellulaire étudié.
• Pour l'ELISA, testez différents tampons de revêtement et différentes dilutions d'anticorps ; utilisez une étalon de protéine CASK recombinante pour établir une courbe d'étalonnage fiable.
• Comme il s'agit d'un réactif polyclonal, effectuez une titration systématique et une optimisation du blocage pour réduire le bruit de fond non spécifique dans chaque application.

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