Anticorps polyclonal anti-Troponine I cardiaque (TNNI3) pour WB, IP, IF-P, ELISA - P19429

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Troponine I, muscle cardiaque

• La Troponine I (TnI) est la sous-unité inhibitrice du complexe troponine, qui régule la contraction du muscle strié en conférant une sensibilité au calcium à l'activité ATPase actomyosine.
• La troponine I cardiaque (cTnI) est spécifiquement exprimée dans le muscle cardiaque et est un biomarqueur bien établi des lésions myocardiques.
• Le gène TNNI3 code pour l'isoforme cardiaque, et des mutations dans ce gène sont associées à des cardiomyopathies héréditaires telles que la cardiomyopathie hypertrophique et restrictive.
• En tant que protéine liant l'actine, la cTnI se lie à l'actine-tropomyosine en l'absence de calcium, inhibant la contraction ; la liaison du calcium à la troponine C lève cette inhibition.
• Les modifications post-traductionnelles, y compris la phosphorylation et l'acétylation, modulent sa fonction et sont cruciales dans la physiologie et les pathologies cardiaques.
• La protéine partage des domaines conservés avec d'autres isoformes de la troponine I (muscle squelettique à contraction lente et rapide), mais l'extension N-terminale est unique à la forme cardiaque et contient plusieurs sites de phosphorylation.
• La cTnI se localise au niveau du filament mince sarcomérique, contribuant à l'intégrité structurelle et à la régulation dépendante du calcium des myofibrilles cardiaques.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre la cTnI humaine pleine longueur (aa 1-210), ce qui suggère que l'anticorps reconnaît la majorité de la séquence protéique. Lorsqu'il est utilisé en Western blot, attendez-vous à une bande autour de 24 kDa dans les lysats de tissu cardiaque humain, murin et rat.
• Pour l'immunoprécipitation (IP), envisagez d'utiliser 1 à 2 µg d'anticorps pour 500 µg de lysat protéique et optimisez en fonction de l'abondance de la cible. Incluez des contrôles appropriés pour confirmer la spécificité.
• En immunofluorescence sur coupes paraffinées (IF-P), une étape de récupération antigénique par chauffage dans un tampon citrate (pH 6.0) est souvent bénéfique pour exposer les épitopes. Testez avec des coupes de tissu musculaire cardiaque.
• Pour l'ELISA, cet anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection. Associez-le à un anti-cTnI monoclonal pour développer un test sandwich sensible ; la réactivité croisée avec la cTnI de souris et de rat peut être avantageuse pour les études précliniques.
• Puisque l'anticorps présente une réactivité croisée avec la souris et le rat, il convient à la recherche translationnelle utilisant des modèles animaux courants. Cependant, validez toujours dans l'espèce et la matrice d'échantillon pertinentes.

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