Anticorps polyclonal Anti-CARD8 pour WB, ELISA - Q9Y2G2

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CARD8

• CARD8 (Protéine 8 contenant un domaine de recrutement de la caspase), également connu sous le nom de CARDINAL, TUCAN, NDPP1, DAKAR, DACAR ou NDPP, est unembre de la famille des protéines contenant un domaine CARD.
• CARD8 agit comme un capteur de l'inflammasome, reconnaissant des signaux pathogènes/dommages tels que l'activité de la protéase du VIH-1 ou l'inhibiteur Val-boroPro, et médie l'activation de l'inflammasome conduisant à la pyroptose des lymphocytes T CD4+ et des macrophages.
  Références connexes : PMID:11408476, PMID:11821383, PMID:15030775, PMID:32840892, PMID:33542150, PMID:36357533
• La protéine pleine longueur subit un traitement autoprotéolytique dans le domaine FIIND, générant des fragments N-terminal et C-terminal qui restent associés de manière non covalente en l'absence de stimuli.
• Lors de la détection de pathogènes, le fragment N-terminal est ubiquitiné et dégradé par le protéasome, libérant le fragment C-terminal pour former l'inflammasome CARD8, qui recrute directement la pro-caspase-1 et favorise son activation, entraînant le clivage de GSDMD et la pyroptose.
  Références connexes : PMID:32558991, PMID:32051255, PMID:32840892, PMID:33053349, PMID:34019797
• En plus de son rôle dans l'inflammasome, CARD8 fonctionne également comme un régulateur négatif de l'activation de NF-kappa-B et de l'inflammasome NLRP3.
  Références connexes : PMID:11551959, PMID:12067710, PMID:24517500
• CARD8 est localisé dans le cytoplasme, le noyau et les complexes d'inflammasomes assemblés.
• CARD8 est fortement exprimé dans le poumon, l'ovaire, le testicule et le placenta, avec une expression plus faible dans le cœur, le rein et le foie ; il est également exprimé dans la rate, les ganglions lymphatiques et la moelle osseuse.
  Références connexes : PMID:11551959, PMID:11821383
• CARD8 joue un rôle dans la défense de l'hôte contre le VIH-1 : il détecte l'activité de la protéase du VIH-1, conduisant à l'élimination du virus latent après la réactivation virale, tandis que le VIH-1 peut échapper à la détection en maintenant l'inactivité de la protéase dans les cellules infectées.
  Références connexes : PMID:33542150

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène correspond à la région N-terminale des acides aminés 1-200, donc l'anticorps reconnaît probablement le CARD8 pleine longueur et son fragment N-terminal. Envisagez de vérifier la spécificité en analysant les produits du traitement autoprotéolytique dans les lysats cellulaires.
• Pour le western blot, utilisez des lignées cellulaires ou des tissus humains avec une expression confirmée de CARD8 (par exemple, macrophages THP-1, lysats de poumon ou d'ovaire). La protéine pleine longueur prédite est d'environ 61 kDa, mais des fragments de clivage peuvent également être détectés. Incluez des témoins positifs et négatifs appropriés.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé dans des formats sandwich ou indirect. Associez-le à un anticorps de détection dirigé contre un épitope distinct de CARD8 pour assurer la spécificité du test.
• Comme cet anticorps polyclonal est validé pour CARD8 humain, la réactivité croisée avec d'autres espèces doit être testée expérimentalement. Envisagez d'utiliser des activateurs de l'inflammasome (par exemple, Val-boroPro) ou des inhibiteurs de la protéase du VIH-1 dans des modèles d'infection pertinents pour étudier la dynamique de CARD8.

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