Anticorps polyclonal de lapin anti-anhydrase carbonique 9 (CA9/G250) pour WB - Q16790

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l'anhydrase carbonique 9

• L'anhydrase carbonique 9 (CA9/CA-IX) est un membre de la famille des alpha-anhydrases carboniques et code une métalloenzyme transmembranaire à zinc.
• Elle catalyse l'hydratation réversible du dioxyde de carbone en bicarbonate et en protons, jouant un rôle essentiel dans la régulation du pH.
• La CA9 est principalement exprimée dans les lignées cellulaires de carcinome, avec une expression limitée dans les tissus normaux, particulièrement abondante dans les cellules épithéliales de la muqueuse gastrique.
• Elle se localise dans la membrane cellulaire, la membrane des microvillosités, le noyau et le nucléole.
• La protéine subit des modifications post-traductionnelles, notamment une phosphorylation et une glycosylation, et contient des ponts disulfure.
• Principales caractéristiques structurales : peptide signal, hélice transmembranaire et site de liaison au zinc essentiel à son activité catalytique.
• Le poids moléculaire est d'environ 49,7 kDa (UniProt), mais la protéine est souvent observée à 50 kDa en raison de la glycosylation.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond au domaine extracellulaire (aa 52-151) ; il peut être utile de tester l'anticorps dans des conditions non réductrices afin de reconnaître la conformation native.
• Pour le Western blot, valider l'anticorps avec des lysats de cellules humaines de carcinome traitées en hypoxie (par ex. HT-29, HeLa) ; s'attendre à une bande autour de 50 kDa.
• L'IHC-P peut nécessiter une récupération antigénique et un ajustement de la dilution pour détecter une coloration membranaire et/ou nucléaire dans des échantillons tumoraux.
• Pour l'IF/ICC, inclure des étapes de perméabilisation afin de détecter les pools intracellulaires et effectuer une co-coloration avec des marqueurs membranaires.
• Les performances de l'ELISA peuvent être évaluées avec la protéine CA9 recombinante ; optimiser les conditions de revêtement et de détection.

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