Anticorps polyclonal de lapin contre l'anhydrase carbonique 9 (CA9/G250) pour WB, ELISA - Q16790

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'anhydrase carbonique 9 (CA9/G250)

• CA9, également appelée CAIX, MN ou G250, est une anhydrase carbonique transmembranaire qui catalyse l'hydratation réversible du dioxyde de carbone en bicarbonate et en protons, jouant un rôle clé dans l'homéostasie du pH.
• La protéine se localise sur la membrane cellulaire, en particulier la membrane des microvillosités, et est également présente dans le noyau et le nucléole.
• Dans les tissus sains, son expression est très limitée, avec les niveaux les plus élevés dans les cellules épithéliales de la muqueuse gastrique. Cependant, elle est fréquemment surexprimée dans les lignées cellulaires carcinomateuses, ce qui en fait un marqueur associé aux tumeurs très utile.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation N-liée, la phosphorylation et une liaison disulfure, qui peuvent influencer sa stabilité et sa fonction.
• L'enzyme nécessite du zinc comme cofacteur pour son activité catalytique, une caractéristique des alpha-anhydrides carboniques.
• Les noms alternatifs tels que carbonate déshydratase IX, antigène associé au carcinome rénal G250 et p54/58N reflètent ses rôles en physiologie et en oncologie.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 52 à 151 du domaine extracellulaire. Pour le Western blot, il est recommandé d'utiliser des lysats cellulaires totaux ou des fractions membranaires dans des conditions réductrices pour rompre les liaisons disulfure.
• Les applications en ELISA peuvent nécessiter une titration pour optimiser le rapport signal/bruit. Validez la réactivité croisée avec des échantillons de souris et de rat en utilisant des contrôles appropriés.
• En raison de l'expression limitée dans les tissus sains, la détection dans des lysats tissulaires peut bénéficier d'étapes d'enrichissement ou de l'utilisation de lignées cellulaires carcinomateuses comme contrôle positif.
• Pour des applications telles que l'IHC ou l'IF, une optimisation est recommandée car les conformations natives peuvent masquer l'épitope reconnu par cet anticorps polyclonal.

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