Anticorps monoclonal de lapin anti-Anhydrase carbonique 9 (CA9/G250) pour WB, IHC-P, ELISA - Q16790

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Anhydrase carbonique 9 (CA9/G250)

• L'anhydrase carbonique 9 (CA9, également connue sous le nom de CA-IX, CAIX, MN, G250) est un membre de la famille des anhydrases carboniques qui catalyse l'hydratation réversible du dioxyde de carbone en bicarbonate et protons, jouant un rôle clé dans la régulation du pH.
• C'est une enzyme transmembranaire principalement localisée à la membrane plasmique et à la membrane des microvillosités, mais elle a également été détectée dans le noyau et le nucléole.
• Son expression est très restreinte dans les tissus normaux, avec l'expression la plus abondante trouvée dans les cellules épithéliales de la muqueuse gastrique ; cependant, elle est fortement régulée à la hausse dans de nombreuses lignées cellulaires cancéreuses, ce qui en fait un antigène tumoral bien connu.
• La CA9 est impliquée dans l'adaptation des cellules tumorales aux microenvironnements hypoxiques et acides, facilitant la survie et l'invasion des cellules cancéreuses.
• La protéine contient un domaine catalytique liant le zinc et subit plusieurs modifications post-traductionnelles, notamment la formation de ponts disulfure, la glycosylation et la phosphorylation ; sa forme mature est également sujette à un clivage protéolytique.
• Selon UniProt, le poids moléculaire calculé est d'environ 49,7 kDa, et elle migre à environ 50 kDa en SDS-PAGE.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond à une séquence peptidique interne (acides aminés 200-300) de la CA9 humaine ; tenez compte de la localisation de l'épitope (domaine intracellulaire) lors de la conception des expériences et du choix des protocoles de perméabilisation ou de démasquage antigénique.
• Pour le Western blot, une bande principale autour de 50 kDa est attendue ; validez l'anticorps dans des lignées cellulaires avec des niveaux d'expression connus de CA9 (par exemple, des lignées cellulaires cancéreuses) et optimisez les conditions de chargement et de blocage.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), effectuez un démasquage antigénique en utilisant des méthodes thermiques ou enzymatiques, et titrez l'anticorps pour minimiser le bruit de fond ; incluez des contrôles tissulaires positifs et négatifs appropriés.
• Dans les applications ELISA, l'anticorps peut potentiellement être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; envisagez de l'associer à d'autres anticorps spécifiques de la CA9 et validez-le dans la matrice d'échantillon pertinente.
• Vérifiez toujours la spécificité en utilisant des modèles de knock-out ou de knock-down si disponibles, et tenez compte de la réactivité croisée avec d'autres membres de la famille des anhydrases carboniques.

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